文档介绍:福建农林大学
硕士学位论文
PCR检测螺类感染广州管圆线虫方法的研究
姓名:魏纪玲
申请学位级别:硕士
专业:临床兽医学
指导教师:王寿昆;周卫川
20090401
摘要随着人们生活水平的提高、交通日益便捷及饮食习惯的改变,使得我国近几狙芯渴状纬晒⒘薚秸爰觳饴堇喔腥竟阒莨茉蚕叱娴氖凳庇法的灵敏度远远高于常规觳夥椒ǎ哂惺奔涠獭⒘槊舳雀摺⑻匾煨郧康臼匝檠芯苛思钢稚泵鸶J俾莸囊┪镌谑笛槭夷诘某醪接τ眯Чü年来食源性疾病的病例增长迅猛,人兽共患的疾病种类也日益增多,广州管圆线虫病便是其中之一。自世纪年代以来我国先后在北京、温州、云南和福州等地发生多起广州管圆线虫病小范围的暴发流行,其中又以年夏秋季北京病例多达嗬I酰鹗忻竦目志搴拖喙胤矫娴母叨戎厥印本文综合介绍了广州管圆线虫病的研究现状、中间宿主的种类及其诊断技术的研究现状。针对目前广州管圆线虫感染的中间宿主螺类的特点,本研究鉴定了来自广州、广西及上海等地的管圆线虫并建立了针对广州管圆线虫的⑹时荧光奶匾煨约觳夥椒ǎ渚哂屑觳馐奔涠獭⒘槊舳雀撸匾煨郧康忍点,并对几种杀灭福寿螺的药物进行了实验室初步研究。本文为贝类鲜活产品等体内的广州管圆线虫检测及野外带疫普查提供了良好的诊断方法,对食品安全、预防和控制广州管圆线虫病暴发和流行具有重要的意义。研究结果如下:嬷旨ǎ罕臼匝橐酝ㄓ靡颴、R铮直鸲源庸阄鳌⒐阒荨福州及上海等地搜集的地方种管圆线虫提取的魑D0澹┰鯥一过对温度、引物浓度等条件进行优化,获得约钠危缶庑蜓橹ぃ果与瞎阒莨茉蚕叱嫘蛄邢嗨菩源%,所以判断以上几个地方的管圆线虫均为广州管圆线虫。臼匝槭状谓⒘顺9鍼方法检测中间宿主福寿螺、非洲大蜗牛、白肉蜗牛等体内的广州管圆线虫的方法。根据瞎阒莨茉蚕叱娲笱腔蛐列设计~对广州管圆线虫的特异性引物,优化了各种从μ跫峁允此方法具有较高的特异性且灵敏度明显高于组织匀浆法,达到快速、灵敏地检测广州管圆线虫中间宿主的效果。光觳夥椒ǎ≡癖J厍蛏杓芓秸爰捌湟铮昙欠⒐饣藕淬灭基团,对影响从Φ囊幌盗幸蛩亟辛擞呕峁⒌挠ü釶方优点。福建农林大学硕士学位论文
关键词:广州管圆线虫;螺类;菏凳庇ü釶;检测;建立ッ艽铩%、、及福寿螺死亡数统计死亡率,以此确定三种药物的杀螺效果。结果显示ス诖锛靶乱%氯代水杨胺在同等浓度下杀螺效果稍高于ッ艽铩说明新药氯代水杨胺有一定的应用前景,实验室内也有一定的限制性,有待于进一步田间试验确定。福建农林大学硕士学位论文Ⅱ
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日期.,叫·学位弦论文作者亲笔签名:越识肩/拿日期:川迹指导教师亲笔签名:砂霹够学位弦论文作者亲笔签名:越幻诊∥日期:独创性声明论文使用授权的说明本人声明,所呈交的学位弦论文,是本人在指导教师的指导下独立完成的研究成果,并且是自己撰写的。尽我所知,除了文中作了标注和致谢中己作了答谢的地方外,论文中不包含其他人发表或撰写过的研究成果。与我一同对本研究做出贡献的同志,都在论文中作了明确的说明并表示了谢意,如被查有侵犯他人知识产权的行为,由本人承担应有的责任。本人完全了解福建农林大学有关保留、使用学位弦论文的规定,即学校有权送交论文的复印件,允许论文被查阅和借阅:学校可以公布论文的全部或部分内容,可以采用影印、缩印或其他复制手段保存论文。保密,在年后解密可适用本授权书。不保密,本论文属于不保密。口』
第一章广州管圆线虫及⒂ü釶技术研究进展阒莨茉蚕叱娴闹饕L匦臃⑾种两褚丫嗄辏广州管圆线虫在分类上隶属于线形动物门⑾叱娓⒃蚕叱婺⒑笤蚕叱婵、丝线虫亚科、管圆线虫属K淙辉缭兰甏从晌夜д叱滦奶战淌晔紫在广州黑家鼠和褐家鼠体内肺部血管发现⋯,将其命名为广州肺线虫。后由学者暝谔ㄍ灞ǖ溃瓴庞蒁订正为本虫【。据悉,这是国家新发传染病中首个以地名命名的疾病。其成虫寄生于啮齿动物肺动脉血管内,第Ⅲ期幼虫侵入人体中枢神经系统引起嗜酸性粒细胞增多性脑膜脑炎或脑膜炎‘,称为广州管圆线虫病,简称“酸脑”。成虫形态结构成虫呈线状,雌雄异体。细长,活体呈白色,两端略细,角皮透明光滑,体表有微细环状横纹,头端钝圆,头项中央有一小圆口,缺口囊。口周围有环状的唇,外有感觉乳突Γ咳个。在内圈霾嗳橥煌庠蹈饔个头感器开口。雄虫长,宽.,尾端略向腹部面弯曲,交合伞对称。肾形,内有辐肋支撑。睾丸前端达虫体线处,贮精囊与输精管位于虫体后处。泄殖腔开口位于交合伞内面中央,交合刺瘸ぃ首厣ǎ吆嵛疲甇~.,引带不明显。交合伞肋的形态虽为鉴定种的主要依据之一,但应注意存在个体和地区群体间的差异。雌虫:虫体平均长约.~