文档介绍：答辩委员会成员:—————奎塞夏二三兰芒敝鼬:镁—堂幽燃二一———趔蛐————』坚墼墼———幽蛐羹篡孑~—避逝垣论文答辩日期:————ド旦—————‘±:丛佑千仟匠—————捍杂干仟匠
——塑塑堕堂堕堡主兰焦堡塞录⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯谢⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.述⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯言⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯文⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯结果⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯结果⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯小结⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯第一部分广州管圆线虫不同发育时期蛋白质双向荧光差异凝胶电泳第二部分广州管圆线虫不同发育时期差异表达蛋白的质谱鉴定材料与方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯参考文献⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.独创性声明⋯目录中文摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯英丈摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯前材料与方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯分析与讨论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.分析与讨论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.致综正小结⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.⋯⋯⋯.附⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯
广州管圆线虫不同发育时期蛋白差异表达的研究中文摘要目的方法广州管圆线虫病,是由广州管圆线虫幼虫侵害人的中枢神经系统引起的,是一种人兽共患寄生虫病。寄生虫需要通过改变宿主来完成其生话史,因此,他们有根据宿主环境来调节基因的差异表达的能力。广州管圆线虫生活史的完成需要几个不同的宿主。成虫寄生在正常宿主大鼠体内,大鼠可排出谟壮妫甀期幼虫经水进入中间宿主如福寿螺等软体动物体内,并发育成为珊期幼虫;ⅢⅣ、谟壮妫僖菩兄列摹⒎尾垦9苣诜⒂沙沙妗蛋白质组学已经成为研究蛋白质结构、功能和相互作用以及基础生物学的典范,可以从整体层次上,更精确、贴切地反映蛋白质的表达情况。而线虫是最好的研究模式生物之一。差异蛋白质组学主要用于筛选和鉴定不同种类和状态下各样本蛋白质组之间的区别和变化,寻找任何能引起样本间差异蛋白质谱的有意义的因素,从而能进一步认识个体生理的发展与变化。双向荧光差异凝胶电泳相对于传统的坝向电泳能够避免胶与胶之间的变异并提高敏感性,在发育生物学和组织蛋白质组学研究中更显其优势。本研究运用双向荧光差异凝胶电泳和质谱相结合的蛋白质组学技术分析罄定广州管圆线虫不同发育时期的差异表达蛋白质。τ玫鞍字首檠蛴ü獠钜炷旱缬竞椭势准际醴治黾ü阒莨茉蚕叱姊騃期幼虫,诖菩鄢婧痛菩鄢沙娴牟钜毂泶锏鞍字省⒁桓鑫榷ǖ墓阒莨茉蚕叱娌煌⒂逼诘鞍字首榈乃蛴ü獠钜炷旱泳图谱,利用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱技术对广州管圆线虫不同发育时期的差异表达蛋自质进行质谱分析和鉴定,建立一个可靠的蛋白质组学生物技术。教挚赡苡牍阒莨茉蚕叱娌煌⒂逼诘纳し⒂喙氐牡鞍字剩梢晕K主环境在寄生虫发育过程中的调控或宿主寄生虫相互作用中的关键蛋白质提供依据。广州管圆线虫虫体的收集:实验室条件下建立广州管圆线虫生活史,分别于感染的不同时期收集广州管圆线虫Ⅱ谟壮妗期雌虫、谛鄢妗⒋瞥沙温州医学院硕士学位论文
结果鞍籽返闹聘鳎航占某嫣宸直鹗褂昧呀庖毫呀狻⒊呀狻⒗胄模蛴ü:サ腟柘蛴ü、数据库检索怨阒莨茉蚕叱个样品及内标进行双向荧光差异凝胶电泳后,得到了清晰的蛋白质表达谱。用和激光扫描仪于荧光模式下进行、す馍瑁块张胶共得到“张荧光扫描图谱。鼶软件分析,校准后,、和个蛋白点在谟壮嬷斜泶锷系鳎挥斜硐殖鱿灾性别差异;与蚱谟壮嫦啾龋、臁、、、和等个蛋白点在成虫和谟壮嬷猩系鳎喾吹模、和等个蛋白点在Ⅲ期幼虫中出现明显上调:雌雄虫及谟壮雌雄比较中,点在雄虫和谟壮嫘鄢嬷芯泶锷系鳌势追治霾钜斓鞍椎悖竦秒闹柿恐肝仆计,经数据库检索,鉴定了其中个蛋白质。%是细胞骨架相关蛋白,如肌动蛋白和副肌球蛋白;%功能蛋白与代谢过程、:胞凋亡、炎症反应、蛋白质水解、抗氧化和免疫调节等许多生理和病理过程。隫期雌虫相比,过氧化物氧还蛋白、吲哚胺积加氧酶温卅窖г核妒垦宦畚和雄成虫,,使用猂舛ǖ鞍字逝ǘ取7肿昂笠低温保存。玖媳昙堑鞍字剩悍直鹩肅或甑缪罚珻标记内标。禾醯钠胶和%是未知的蛋白质。这些差异表达蛋自在细胞黏附、细和在雌成虫中上调:肌钙蚩白易、疞
结论蛋白质二硫化物异构酶和半乳糖凝集素在诖瞥嬷鞍锥蚧镆旃姑桶肴樘悄豯坏赩期雌虫中高沙婧蛌期幼虫与Ⅲ期幼虫相比,过氧化物氧还蛋白、吲哚胺双加氧酶和在成虫和谟壮嬷上调;肌动蛋白冖笃谟壮娓弑泶铩菩鄢沙姹榷灾校父龉δ艿鞍椎谋泶镌诖瞥沙嬷猩系魅邕哦