文档介绍：多糖的检测方法关于多糖含量测定,业内有两种评价方法。一种是狭义上严格的多糖测定,即水提取多糖后,以凝胶色谱柱分离、洗脱提纯粗多糖得到较单一分子量的多糖,再水解成各种单糖,以HPLC法分离测定各单糖,即可得到比较严格意义上的多糖含量及其组成。这种方法是科研级的多糖测定。另一种评价方法一般是生产企业用于质控的多糖测定:一般过程是水提醇沉粗多糖后,以葡萄糖作为相比较的物质,加入特定显色剂后比色测定粗多糖的含量。注意,这种方法测得的是以葡萄糖作为折算的多糖含量。但这种评价方法简单实用,能反映一定的质量指标,作为质控之用可以的了。包括中国药典和一些国标、行标都采用此方法评价多糖含量,方法大同小异,如硫酸-苯酚法,硫酸-蒽***法。但根据不少实际检验人的反映,要想检测结果有很好的重现性,还是有很多细节问题要注意的。粗多糖测定多糖的测定方法,目前有碱性酒石酸铜滴定法、比色法(蒽***比色法、硫酸-苯酚法)。一般说来,比色法的优点是灵敏度高,样品用量少;但缺点是一般做常规检测时使用葡萄糖作标准品,误差较大,应以被测物的纯品作对照品,以求出换算因子,但要制备被测物的纯品并非每个实验室所能做到的,而且保健食品中往往是多种中草药的提取物作为原料而制成,所含多糖是不同相对分子量多糖的混合体,这就给提取纯品增加了难度。所以当成品中多糖含量大于1%(质量浓度)时,最好选用碱性酒石酸铜滴定。,精密称定,置于250ml磨口烧瓶中,精密加水50ml,称定重量,置沸水浴回流2小时,放置至室温,用水补足减失重量,混匀,滤过,精密吸取续滤液15ml于100ml离心管中,加无水乙醇75ml,混匀,以4000r/min离心10min,并小心弃去上清液,再加15ml热水(温度>90℃)冲洗离心管中沉淀物,重复一次后再以4000r/min离心30min,弃去上清液,沉淀用乙醇液(水:乙醇=15:75)洗涤两次,离心,弃去洗涤液。(温度>90℃)少量多次转移至250ml磨口三角瓶中,加入15ml浓盐酸,开启冷凝管,在沸水浴中回流2h,冷却,先用40%的氢氧化钠(约15ml)粗调Ph值,后用稀的氢氧化钠溶液细调,~。将中和的酸解液移置至100ml容量瓶中,加水定容至刻度,摇匀,过滤,滤液供滴定用。、乙液各5ml于150ml的锥形瓶中,加10ml蒸馏水及2粒玻璃珠,。,务必在2分钟内至沸,并保持溶液在微沸状态下再用标准葡萄糖溶液滴定,以每2秒1滴的速度滴定至蓝色刚好褪去为终点,记录消耗葡萄糖标准溶液的总体积。同法平行操作三份,取其平均值(V1)。。、乙液各5ml于150ml的锥形瓶中,精密加入10ml蒸馏水及2粒玻璃珠,控制在2分钟内加热至沸,保持溶液在微沸状态下以先快后慢的速度,从滴定管中滴加样品水解液液进行滴定,直至溶液蓝色刚好褪去为终点,记录葡萄糖标准溶液消耗体积。,置于150ml锥形瓶中,精密加入蒸馏水10ml及玻璃珠2粒,从滴定