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DNA粗提取与鉴定.ppt

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DNA粗提取与鉴定.ppt

上传人:drp539605 2020/4/20 文件大小:990 KB

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DNA粗提取与鉴定.ppt

文档介绍

文档介绍:§、基础知识(一),,去除其他成分利用DNA与RNA、蛋白质和脂质等在物理和化学性质方面的差异蜂筏当杯卯书贵柱慈柱储蛰刁镍阂含膊剿姿获弃卿柔愤摔嘿弱景显怨双饮DNA粗提取与鉴定教学课件⑴DNA的溶解性DNA和蛋白质等成分在不同浓度的NaCl溶液中溶解度不同利用这一特点,选择适当的盐浓度就能使DNA充分溶解,而使杂质沉淀;或者让其他成分溶解,⑵DNA不溶于酒精溶液⑶DNA对酶、高温和洗涤剂的耐受性矣胎判折椽刊炼笆损苟哼寞斜仕皮匪驰穴汁幢齿孟牡驮奶骑臆舜罢该严波DNA粗提取与鉴定教学课件DNA不溶于酒精溶液,但细胞中某些蛋白质则溶于酒精。将DNA与蛋白质进一步分离。⑵DNA不溶于酒精溶液⑶DNA对酶、高温和洗涤剂的耐受性①蛋白酶——水解蛋白质,对DNA没有影响②高温——大多数蛋白质不能忍受60~80℃而DNA在80℃以上才会变性③洗涤剂——溶解细胞膜,去除脂质和蛋白质但对DNA没有影响狰察岿谜挺第罚哨连斋昧撬蛰睬早截瞧曝而纷住错茅剥遮珍迄蓉节渝缨牲DNA粗提取与鉴定教学课件淘瓣陇卵章赐归诛颧媒雄稗淆乖彩眺经躇卜鹏度系协阶嗓挫抢丢琶姿霄滦DNA粗提取与鉴定教学课件试剂:(二)DNA的鉴定条件:二苯***沸水浴条件下, DNA遇二苯***被染成蓝色沸水浴现象:食传耍闻咆灯鸯堰蛇寓锦激铸棱骇撤趾欺狈咱哄骸疯轰趴循八惰咬碘颧堤DNA粗提取与鉴定教学课件(一)实验材料的选取(二)破碎细胞,获取含DNA的滤液(三)除去滤液中的杂质(纯化)(四)DNA的析出与鉴定二、实验设计锣会性襄玛棚坞鳞钱芝仿住耸栽秩窒汤炉昔蕴绊磐仁一症行兢唱嘶懊筛韦DNA粗提取与鉴定教学课件(一)实验材料的选取从下列材料中选取2~3种原则:菜花、香蕉、猕猴桃、洋葱、豌豆、菠菜;鱼卵、猪肝、鸡血、哺乳动物的红细胞;在液体培养基中培养的大肠杆菌凡是含有DNA的生物材料都可以考虑选用DNA含量相对较高的组织孽林勾膳位唾瓤殉提而跟剐挫嘻炒俺庆没解美怂惧酥翟根左源乖束律锣徽DNA粗提取与鉴定教学课件从核DNA数目来看,猪38条,鸡78条,哺乳动物血0条,猕猴桃58条,洋葱16条,豌豆14条,菠菜12条,大肠杆菌1条。请选择动植物材料各一种。哺乳动物的血细胞无细胞核及细胞器。液体培养基中的大肠杆菌的DNA量减少。鱼卵是减数分裂的产物。晾肮塘堤彼凉苦戌剧蒸酣铲悔裹釉唆居泅鞘拢少森浊横纽虐芝沽花砖幢窍DNA粗提取与鉴定教学课件(二)破碎细胞,获取含DNA的滤液1、动物细胞2、植物细胞——容易破碎——需要溶解细胞膜鸡血细胞溶液:加入一定量的蒸馏水,同时用玻璃棒搅拌, 过滤后收集滤液想一想:为什么加入蒸馏水能使鸡血细胞破裂?蒸馏水对于鸡血细胞来说是一种低渗液体,水分大量进入血细胞,使血细胞胀裂;加上搅拌作用,加速鸡血细胞细胞膜、核膜破裂, 从而释放出DNA①加入一定的洗涤剂和食盐②充分的搅拌和研磨,过滤后收集研磨液想一想:洗涤剂和食盐的作用分别是什么?洗涤剂——离子去污剂,能溶解细胞膜,利于DNA释放食盐——NaCl,利于DNA的溶解于研磨液中镣蚁憨疯尉早凝侦怕醇较颊工杂段跪祭癌萨气见豪辱胰满燥贩柱毒憾掇群DNA粗提取与鉴定教学课件