文档介绍：口腔医学研究年月第卷第期
反义核酸对人牙囊细胞生物学特性的影响
赵征徐军明赵威丽黄征难
.解放军第医院口腔科山东青岛;.济南军区青岛第二疗养院
摘要目的:研究反义核酸—对人牙囊细胞增殖、分化、凋亡等生物学特性的影响。
方法:采用细胞培养、基因转染、四唑盐比色法、酶动力学方法和流式细胞术检测反义核酸
转染后对细胞生物学特性的影响。结果:—组的增殖活性、增殖指数、碱性磷酸酶
分泌活性显著降低,凋亡细胞百分比明显上升。结论:反义核酸可显著抑制的增殖和
的活性,显著诱导的凋亡并影响细胞周期的变化。
关键词反义核酸人牙囊细胞增殖分化凋亡
中图分类号文献标识码文章编号———
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金属蛋白酶解离素. 种胞浆蛋白参与了牙胚从蕾状期到钟状晚期、从基
,是家族近年发现的质分泌到硬组织形成的牙冠、牙根形态发生过程,尤
定位于细胞表面拥有蛋白水解和粘附特性的跨膜分其在成釉器、牙乳头和牙囊的初始发育中发挥重要
泌型糖蛋白.,它有两个亚型:表型的调控作用。真核质粒转染人牙乳头细
和分泌型。的作用底物可能胞、牙囊细胞后可显著促进两类细胞的增殖、分化并
包含细胞外基质的某些成分,其功能主要在胞质和抑制其凋亡。
细胞表面。已知有广泛的生物学作用: 本实验拟应用反义核酸—技术,设计
参与细胞增殖、分化,胞外基质重建、裂解基质蛋白, 合成与特异序列互补的—
促进细胞黏附聚集和细胞迁移等。和正义对照—同时转染体外培养的人牙囊细
前期我们从临床先天性牙根发育不良患儿的差胞,后,观察对其
异表达基因中筛选出基因,证实了其与牙增殖、分化、凋亡等生物学特性的影响,期望从基因
齿、牙根发育的密切关系。通过对其原核、真核表达治疗角度为牙根发育不良疾病的临床治疗提供实验
系统的深入研究,结果显示:功能主要在和理论依据。所谓反义核酸是指与基因组/
牙源性间充质细胞的胞质和细胞表面,可能作为一或互补,并可与之相应结合的/
链。反义核酸通过碱基互补与靶基因结合后
基金项目国家自然科学基金资助编号: 即可抑制、阻断或调节该基因的表达,。
作者简介赵征~ ,女,山东青岛人,主治医师,博士,主要从材料与方法
事口腔内科学临床及基础的研究工作。
. 主要试剂和仪器胰蛋白酶、胶原酶、低糖
通讯作者赵征,—:.
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培养基、、一、孔培养板用无血清培养液稀释;每孔
,; 细胞培养皿公司, 脂质体用无血清
;标准新生牛血清郑州佰安生物工程有限公培养液稀释,室温孵育,一旦脂质体被
司;,;碱性磷酸酶检测试剂盒稀释,要在内与混合,否则会导致活性
南京建成生物制品研究所;免疫组化即用下降;将、的与脂质体混合,室温孵育
型试剂盒,,显色试剂盒武汉博士,以形成复合物;将的复合物直接
德公司,脂质体, 加入培养板各孔内,轻轻混匀;培养后,换为
;抗人波形丝蛋白单克隆抗体, 含%血清的常规培养液继续培养。为防
,、抗人细胞角蛋白单克隆抗体, 止血清成分影响检测结果,次日更换为无血清
,;超净工作台苏州净化设备厂,: 培养液,继续培养此时细胞数量、形
细胞培养箱,,酶联免疫检测仪华