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纤维素降解混合培养物的基因序列分析张科贵,於蝶,杨景艳,王顺昌未培养微生物侵甘芟钟屑际醯南拗频贾伦匀唤缰芯蟛糠值奈⑸是无法纯培养的,甚至是还不曾认识的,这些还不能被纯培养的微生物就叫未培养的微生物⋯...—...茨鲜Ψ堆г荷蒲担不栈茨摘要:以牦牛瘤胃内容物为接种物,,共获得个序列,%;龉啪男蛄杏爰淄榫基因相似性分别为%和%,占总序列的%;个序列属于未培养细菌,,其中鑫磁嘌种в朐谄渌肪持械酿じ皆谙宋厣系牧鑫赶妇基因序列相似性ィ测这辔⑸锟赡苡胂宋亟到庀喙兀关键词:牦牛瘤胃;纤维素降解;基因文库;未培养微生物中图分类号:文献标志码:文章编号:——一—琖,籧收稿日期:——基金项目:国家自然科学基金资助项目;安徽省科技厅自然科学基金资助项目换茨鲜科技局科技计划项目资助作者简介:张科贵,男,山东胶州人,淮南师范学院讲师,博士.—琘琘—:猟甌%.產..%.,...,,
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牧虾头椒由作者实验室保存,克隆载体购自上海生工生物工微生物的研究方法是提取环境样品的总扩增基因并测序;通过比对序列,,为我们探知未培养微生基因序列发现仅有“%是已培养的微生物,剩下的%的序列代表的未培养细菌和不可培养细菌构建文库发现了游动甲烷微菌鸵焕嗍粲谌仍奈磁嘌微生物口。.通过构建基因文库,将基因相似性%作为不同的进化分支标准,发是生长于西藏、青海、甘肃和四川等地的特有物种,饲料以牧草为主,其生存及饲粮条件差,但却有很强的生存能力,其瘤胃对饲料的利用效率很高,瘤胃微生物降解牧草类纤维素能力较高,,作者以牦牛瘤胃内容物为接种源,以滤纸纤维素为单一底物,富集到一个能够快速降解滤纸的混合培养物,试图从此混合培养物出发,利用非培养的方法分析微生物的物种组成,,、蛋白酶⑾妇蜃镈提取试剂盒、锎炕约梁小⒅柿L崛∈约梁泄鹤陨虾Iど锕こ坦荆黄渌9治二糖和葡萄糖,添加适量的微量金属元素和维生素,以滤纸条禄R缓牛薪又至鑫改谌菸锖培养鄄炻酥教踅到庀窒蟛⒋ù》椒ㄊ窃谔崛￡笈A鑫改谌菸镒蹹的方法;∩辖懈慕模喝降解后的培养物脂糖凝胶电泳检测提取效果;提取物于一。4姹赣茫以不同稀释度糄稀释、、的混合培养物基因组总D0澹酝ㄓ靡物、寻找新基因及其产物提供了新的方法,,分析已经发表的瘤胃微生物的眉淄榫基因探针现牦牛瘤胃%以上的瘤胃微生物属于未培养微生物,黄牛瘤胃中未培养微生物的数量占到%基因相似性%作为不同的进化分支标准,‘.通过构建荷斯坦奶牛瘤胃微生物元基因组目猓秆〉骄哂械矸勖富钚院拖宋素酶活性的克隆,序列比对发现这些酶基因均为全新的酶基因∞牦牛,材料样ň。’~..