文档介绍：环介导等温扩增技术快速检测果汁中耐热菌的研究·学位申请人:陈静张伟教授学科专业:微生物学授予单位:河北农业大学答辩日期:晡逶露湃指导教师:袁耀武教授学位类别:理学硕士分类号:豪密级:公珏单位代码:学号:玪兰量
袁煅式学位论文作者签名:侈澎独创性声明多月学位论文版权使用授权书他人已经发表或撰写过的研究成果,也不包含为获得塑兰垦盛些盘堂或其他本学位论文作者完全了解塑宴垦盔些盘堂有关保留、使用学位论文的规阅和借阅。:知多月/签字日期:加耗赆茉翵≯本人声明所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。据我所知,除了文中特别加以标注和致谢的地方外,论文中不包含其教育机构的学位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示谢意。学位论文作者签名:签字日期:年定,有权保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和磁盘,允许论文被查数据库进行检索,可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。C艿难宦畚脑诮饷芎笫视帽臼谌ㄊ导师签名:学位论文作者毕业后去向:工作单位:通讯地址:电话:邮编:
反应的引物是的两条外引物虰。结果表明,检测耐热菌的,使用在线软件://./.,是重要的食品工业腐败菌。其显著特点是可以在温度婧蚿..母呶碌退峄肪诚律ぁ因此巴氏灭菌不能除去此菌。在浓缩果汁中该菌不繁殖代谢,但一旦稀释成低浓度的饮用果汁时,在常温下即代谢产生愈创木酚、卤酚,使果汁口感风味变差、浊度升高、形成沉淀导致产品品质下降。欧美各国要求每还ㄋ踔心腿染暮啃∮个,耐热菌逐渐成为我国苹果汁行业产品出口所遭遇的主要技术壁垒。我国对耐热菌的研究属于起步阶段,主要集中在分离方法和控制上。果汁中耐热菌快速检测方面的研究比较缺乏。传统的检测耐热菌的方法操作繁琐、检测时间较长,通常需要才能完成,并且灵敏度较低。因此需要建立一种快速、灵敏的检测果汁中耐热菌的方法。环介导等温扩增甿虺芁是年等开发出的一种新的核酸扩增技术。该技术以其灵敏度高、特异性强、快速、操作简便、检测成本低等优点在病毒、真菌、细菌以及转基因食品的检测中得到应用。因此,建立技术检测耐热菌对于控制耐热菌引起果汁变质具有重要意义。本文确定了耐热菌的培养方法、菌体计数方法,研究了崛》椒ǎ⒅备了崛∫海魑狶觳獾哪0濉Q≡馧ú嫉哪腿染谋J匦蛄反应的跻铩对反应条件进行优化,建立了的反应体系为:内引物和各/庖和./。的反应过程为:先在℃水浴锅中反应缓笤嫠」中水浴罩狗从Α7从崾螅ü庋酃鄄煊形薨咨ń沽姿崦境恋砑纯膳断反应是否发生,亦可通过琼脂糖凝胶电泳证实反应是否发生。利用方法对昴腿染辏株脂环酸芽孢杆菌属的非耐热菌菌株和株其它芽孢杆菌进行特异性试验。结果表明,昴腿染Q粜裕渌昃株为阴性。为了评估检测耐热菌灵敏度和人工污染检出限,进行了从Γ琍灵敏度为痬斯の廴灸腿染墓募斐鱿尬痬2捎檬剂盒提取诩纯赏瓿煞从Α6哉誔耗时觳饽腿染牧槊舳任痬牧槊舳和检出限是椒ǖ倍。比较了帜0逯票阜椒ǘ訪觳夤心腿染挠跋臁Q芯勘砻鱈方法对制各模板囊G蟛桓摺2捎萌攘呀夥ㄌ崛,不仅节约提取时间,而且也将大大降低检测成本。研究表明方法将成为可以替代南喽晕榷ǖ暮怂崂┰鲂录际酰/琈/
快速检测食源性致病菌构建了一个技术平台。关键词:环介导等温扩增;;检测;耐热菌;苹果汁
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