文档介绍：· 论善·
环介导等温扩增法快速检测结核
杆菌复合群内主要致病菌
洪明查磊付文亮邹民吉李伍举吴奎武徐东刚
摘要目的快速诊断和区分结核杆菌复合群内两种主要致病菌。方法利用环介导等温扩增技术建立快速检
测和区分结核杆菌复合群内主要致病菌的方法,利用该方法对相关的临床分离株样本进行特异性检测,并利用:倍比稀释的
已知菌株模板分析其敏感性。反应结束后通过电泳或向反应管中加入染料肉眼判定检测结果。结果该方法可以
成功检测到主要的结核致病菌:人型和牛型结核分枝杆菌,与包括卡介苗在内的其余相关菌株均未见非特异性交叉反应。检测
的灵敏度可达。拷贝/微升,高于常规方法。结论该检测方法具有敏感、特异、低成本和快速的特点,可检测和区分人型
和牛型结核分枝杆菌,并能排除卡介苗对诊断的干扰。
关键词环介导等温扩增快速检测结核分枝杆菌复合群卡介苗
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结核病是一种严重危害人民健康的传染性疾病, 周期较长~周,同时由于许多结核患者体内存
能够在人和动物之间产生交叉感染,它具有很长的潜在的结核分枝杆菌为型结核菌,该菌种使用传统的
伏期,即机体受结核分枝杆菌感染之后可能经过一段细菌培养方法无法检出,从而降低了结果的可靠
时间后才出现病症。结核杆菌感染人之后主要侵犯性。另外,一些新兴的诊断技术诸如、血清学
肺脏,引起咳嗽、咯血及一系列全身中毒症状。结核方法等由于其操作复杂、试剂盒及所需检测设备昂贵
病患者可长期处于感染状态,他们虽然没有活动性结而导致这些方法大多仅用于发达国家的实验室“。
核那样强烈的传染性,但依然是潜在的结核传染源。发达国家和地区的结核病患者仅占全球患者的% ,
伴随着结核病在全球范围内发病率的不断上升,建立而对于占结核发病率绝大多数的发展中国家而言并
快速、特异、灵敏的检测方法是当今结核病早期诊断不具备普及这些技术的物质基础。我们在环介导等
和治疗的迫切需要。现阶段使用最为广泛的结核检温扩增技术—,
测方法仍然是传统的涂片镜检和菌培养法,前者由于的基础上建立了快速诊断和区分结核分枝杆
敏感度较低而导致大量的假阴性结果,后者不仅培养菌复合群内致病亚型的方法,该方法特异、敏感、快速
及不需要特殊仪器,适于发展中国家、基层医疗和检
疫机构应用。
作者单位: 北京,中国人民解放军军事医学科学院基础医根据最新的流行病学调查显示结核分枝杆菌复
学研究所基因工程研究室
合群内部包括
通讯作者:徐东刚,电子信箱: ...;吴奎武,电子
人型,牛型.
信箱: .
· ·
医学研究杂志年月第卷第期· 论善·
.,.,.卡介苗,. ..。以上菌株由中国人民解放军
,.,。其中对医院结核病研究所提供,大肠杆菌、肺炎链球菌由
人致病的仅有, 本室保存。
. 粗提取:所有菌株均水浴加热,
和.,而
/离心,取上清作为反应模板。
. 仅在西非地区流行,其他地区罕见,国内
.引物设计:利用软件根据结核
尚未见报道,其余几种成员仅在动物之问传播,对人
分枝杆菌基因设计条引物,包括、、、、、
影响不大。本实验通过基因检测技术诊表。该段序列属结核分枝