文档介绍：:..蛋白酶产生菌的筛选组别:第”组班级:生工"班组员:E指导老师:***一、实验目的学****从自然界中分离蛋白酶产生菌二、实验内容蛋白酶产生菌的分离三、实验原理许多细菌和霉菌产生蛋白酶,细菌中的芽抱杆菌是最常见的蛋白酶产生菌。本实验将土壤样品悬液加热处理,杀死非芽砲细菌及其他微生物后进行划线分离得到芽砲杆菌,将其接种到奶粉培养平板并进行培养,根据奶粉平板的水解圈做初筛。将初筛的蛋白酶产生菌接入产酶培养基振荡培养,测定蛋白酶的活力,最终得到产蛋白酶的芽砲杆菌。也可直接将细菌接种到奶粉培养平板进行培养,分离筛选其他蛋白酶产生菌。四、实验材料和用具1•材料:土壤样品2•试剂:牛肉膏蛋白豚培养及平板、奶粉培养基平板、45mL无菌水(带玻璃珠)、芽抱染色液、3•仪器及用具:紫外分光光度计、显微镜、恒温水浴锅、摇床、、游标卡尺、无菌移液管、无菌试管、量筒、容量瓶、漏斗、试剂瓶、漏斗、载玻片、滤纸、擦镜纸。五、操作步(-)配制所需培养基1=按照以下配方配制所需的培养基牛肉膏蛋白腺培养基:牛肉膏0・5g,蛋白豚lg,,〜,水100ml,:牛肉膏0・5g,蛋白豚lg,,,水100ml,〜,配制200mL1•采集土壤样品,用无菌水植被1:10土壤悬液。2•取1:10土壤悬液5mL,注入已灭过菌的试管中,将此试管放入75〜80°C水浴中热处理lOmin以杀死非芽砲细菌。3•取加热处理过的土壤悬液100〜20011L,涂布接种到牛肉膏蛋白豚培养平板,后将平板倒置,于30〜32°C下培养24〜48h・4•对长出的单菌落进行编号,、不透明ad的菌落,挑取少许菌苔涂片,做芽砲染色,判断是否为芽抱杆菌。(三)筛选1、从判定为芽抱杆菌的菌落处,分别挑取少许菌苔,先接种奶粉斜面培养基,再转接奶粉培养基平板上,30〜32°C下培养24〜48h。2、选择水解圈直径与菌落直径比值大的菌,接入牛肉膏蛋白月东培养基30-32°C振荡培养48小时,将发酵液过滤或离心,取清夜检测蛋白酶活力进行复筛。六、实验结果:相关图片:(2)菌株的分离根据菌