文档介绍：环介导等温扩增技术快速检测产毒素性大肠杆菌的研究学位类别:农业推广硕士学位申请人:周金玲指导教师:张伟教授校外导师:张克义高级工程师学科专业:食品加工与安全授予单位:河北农业大学答辩日期:二。一。年十一月二十八日分类号:单位代码:学号:
学位论文作者毕业后执黻籼娜Ⅶ年月低月独创性声明学位论文版权使用授权书签字日期:砂咖年发表或撰写过的研究成果,也不包含为获得塑皇垦盎些盘堂或其他教本学位论文作者完全了解塑宴垦盔些盘堂有关保留、阅。本人授权塑兰垦盔些盘堂可以将学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行本人声明所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及成果。据我所知,除了文中特别加以标注和致谢的地方外,论文中不包含位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献中作了明确的说明并表示谢意。使用学位论文的规定,有权保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和磁盘,允许论文被查阅和借检索,可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。C艿难宦畚脑诮饷芎笫视帽臼谌ㄊ学位论文作者签名:导师签名:签字同期:工作单位:卢龙县质量技术监督局通讯地址:卢龙县卢龙镇棉花市街邮编:电话:.
凝胶电泳,观察梯形条带,以证实是否发生了反应。对反应时间、反应温度、镁离子浓度等扩增条件进行优化,确定儿的反应摘要食品安全突发事件频率高是近年来食品安全问题的一个显著特点,产毒素性大肠杆菌导致的腹泻是公共卫生学上具有重要意义的人畜共患病之一。为确保食品安全与食品贸易,需要大力加强食品检验的力度,迫切需要建立快速、灵敏的产毒素性大肠杆菌的检验方法。环介导等温扩增甿琇是利用跆厥馍杓频囊锖途哂辛粗没换钚缘腄聚合酶,在恒温条件下特异、高效、快速地扩增男录际酢8眉际跻云涮匾煨郧俊⒘槊舳雀摺⒖焖佟⒆既泛筒作简便等优点在核酸的科学研究、疾病的诊断和转基因食品检测等领域得到了日益广泛的应用。本课题采用技术检测产毒素性大肠杆菌槊舳雀撸匾煨郧浚觳夥椒ḿ虮悖氖倍糖壹觳獬杀镜汀U攵圆舅匦大肠杆菌不耐热肠毒素虮J匦蛄形0行蛄性擞迷谙引物设计软件://./.,同时验证了引物的特异性及可行性。建立了检测不耐热肠毒素基因的方法。体系为:内引物和各庖和.,」蟹从缓蠼浞湃嫠」校罩狗从Γü庋酃鄄煊形薨咨焦磷酸镁沉淀,即可判断是否发生了反应。此外,取扩增产物进行デ碇为了比较检测产毒素性大肠杆菌的灵敏度和人工污染检出限,以椒作对照。结果表明,。采用试剂盒提取友反淼奖ǜ娼峁时。。的灵敏度是倍。通过对实际样品进行检测,确定方法敏感性为ィ匾煨晕ィ合率为ァQ芯勘砻鱈ǔ晌?梢蕴娲鶳的核酸扩增新技术,为快速检测食源性致病菌构建了一个技术平台。关键词:环介导等温扩增技术;食品检测;产毒素性大肠杆菌;不耐热肠毒素基因。,
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.舅匦痛蟪Ω司饕V虏∫⊙Ъ按úネ揪丁产毒素性大肠杆菌检测现状⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯。.⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯方法的概述⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯法的基本特点⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯法操作注意事项⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯方法的引物设计⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯方法的基本原理⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯娇诜从Σ锏募觳夥椒ā返璺椒ǖ挠τ谩研究内容⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯牧嫌敕椒ā试验材料⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯..引物设计、反应体系及反应程序⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯返ḿ觳馓跫呕璴浓度对反应的影响⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.从ξ露榷訪从Φ挠跋臁基因组的提取⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯ǘ榷訪从Φ挠跋臁.●■
产物的凝胶成像分析⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯