文档介绍：高效液相色谱技术
在食品营养及安全性分析中的应用
李道锋 201141601036
高效液相色谱技术是在经典液相色谱法的基础上,于60年代后期引入了气相色谱理论而迅速发展起来的。它与经典液相色谱法的区别是填料颗粒小而均匀,小颗粒具有高柱效,但会引起高阻力,需用高压输送流动相,故又称高压液相色谱。又因分析速度快而称为高速液相色谱。
高效液相色谱法定义:
溶于流动相(mobile phase)中的各组分经过固定相时,由于与固定相(stationary phase)发生作用(吸附、分配、离子吸引、排阻、亲和)的大小、强弱不同,在固定相中滞留时间不同,从而先后从固定相中流出。又称为色层法、层析法
高效液相色谱是色谱法的一个重要分支,以液体为流动相,采用高压输液系统,将具有不同极性的单一溶剂或不同比例的混合溶剂、缓冲液等流动相泵入装有固定相的色谱柱,在柱内各成分被分离后,进入检测器进行检测,从而实现对试样的分析。
该方法已成为化学、医学、工业、农学、商检和法检等学科领域中重要的分离分析技术。
原理及应用领域:
①高压:流动相为液体,流经色谱柱时,受到的阻力较大,为了能迅速通过色谱柱,必须对载液加高压。
②高效:分离效能高。可选择固定相和流动相以达到最佳分
离效果,比工业精馏塔和气相色谱的分离效能高出许多倍。
③高灵敏度:,进样量在μL数量级。
④应用范围广:百分之七十以上的有机化合物可用高效液相色谱分析,特别是高沸点、大分子、强极性、热稳定性差化合物的分离分析,显示出优势。
高效液相色谱法特点————“三高一广一快”
⑤分析速度快、载液流速快:较经典液体色谱法速度快得多,通常分析一个样品在15~30分钟,有些样品甚至在5分钟内即可完成,一般小于1小时。
●高效液相色谱法主要类型:
液固吸附色谱
1
液液分配色谱
2
凝胶色谱
4
键合相色谱
3
一. 液固吸附色谱
,其固定相是固体吸附剂。
。
:
①选用的溶剂应当与固定相互不相溶,并能保持色谱柱的稳定性
②选用的溶剂应有高纯度,以防所含微量杂质在柱中积累,引起柱性能的改变。
③选用的溶剂性能应与所使用的检测器相匹配,如果使用紫外吸收检测器,就不能选用在检测波长下有紫外吸收的溶剂;若使用示差折光检测器,就不能用梯度洗脱。
目录
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二、保健食品中主要功效成分的检测方法及原理