mtdna对巨噬细胞nf-κb通路的活化与炎症因子表达研究.pdf

文档介绍：目录
英文缩略词表……………………………………………………………1
中文摘要…………………………………………………………………2
英文摘要…………………………………………………………………3
前言………………………………………………………………………5
第一部分 MtDNA 刺激巨噬细胞 NF-κB 通路的活化与炎症因子表
达……………………………………………………………8
材料与方法…………………………………………………………8
结果………………………………………………………………15
讨论………………………………………………………………28
第二部分吡咯烷二硫氨基甲酸盐(PDTC)对 mtDNA 刺激巨噬细胞
NF-KB 通路的活化与炎症因子的表达…………………30
材料与方法………………………………………………………30
结果………………………………………………………………31
讨论………………………………………………………………39
结论……………………………………………………………………40
参考文献………………………………………………………………40
附录……………………………………………………………………44
感谢……………………………………………………………………45
综述……………………………………………………………………46
参考文献………………………………………………………………51
英文缩写词一览表

英文缩写英文全称中文全称
mtDNA mitochondrial DNA 线粒体 DNA
nDNA nuclear DNA 核 DNA
CpG Cytosine-phosphate-guanosine 胞嘧啶-磷酸-鸟嘌呤
CpG ODN CpG-containing oligonucleotide 含 CpG 的寡核苷酸
ELISA Enzyme-linked immunosorbent assay 酶联免疫吸附法
TLR-9 Toll-like receptor-9 Toll 样受体-9
PDTC pyrrolidinedithiocarbamate 吡咯烷二硫代氨基甲酸盐
TNF-α Tumor necrosis factor-α肿瘤坏死因子-α
IL-1 Interleukin-1 白介素-1
IL-6 Interleukin-6 白介素-6
mRNA Messenger RNA 信使 RNA
NF-κB Nuclear factor-kappa B 核因子κB
ODN Oligodeoxynucleotide 寡核苷酸
SIRS systemic inflammatory response syndrom 全身炎症反应综合征
1
MtDNA 对巨噬细胞 NF-κB 通路的活化与炎症因子表达
的研究
中文摘要
目的全身炎症反应综合征是创伤及烧伤后严重并发症,患者病死率较高。无菌
性全身炎症反应综合征的发病机制及防治至今仍未完全了解。现已知创伤后机体
可产生大量的mtDNA,而mtDNA可激活P38蛋白激酶通路产生炎症因子,但是
mtDNA能否通过TLR-9激活NF-κB通路并产生炎症因子依然未知。本文通过
mtDNA对巨噬细胞NF-κB通路的刺激,进一步探讨无菌性全身炎症反应综合征的
发病机制。
方法第一部分将大鼠腹腔巨噬细胞分为培养基对照组;nDNA(10ug/ml)组;
mtDNA(5ug/ml)组;mtDNA(10ug/ml)组 4 组进行刺激,第二部分分别用 1
umol/ml,5 umol/ml,10umol/mlPDTC 抑制 mtDNA(10ug/ml)组。两部分在不
同时间点,用实时定量 PCR(Real-time PCR)检测 NF-κB 亚单位 p65mRNA、
I-κBmRNA 和 TLR-9mRNA 的表达;用酶联免疫吸附试验法(ELISA)观测 TNF-α、
IL-1 和 IL-6 的含量;用蛋白质印迹法(western blotting)检测磷酸化 I-κB 蛋白含
量、TLR-9 蛋白的含量和 NF-kB 亚基 P65 蛋白含量变化。
结果 mtDNA(5ug/ml)组和 mtDNA(10ug/ml)组均能刺激巨噬细胞中的
TLR-9mRNA 及其蛋白表达增加,NF-κB 亚单位 p65mRNA 及蛋白表达增加,
I-κBmRNA 及其蛋白表达降低,并产生 IL-1 和 IL-6;不同浓度的 PDTC 均能抑制
mtDNA 对巨噬细胞的作用。
结论 mtDNA 能够通过 TL