文档介绍：蚕豆病
皮肤及巩膜黄染
黄疸
恶心、呕吐、面色苍白
尿液镜下未见红细胞
红细胞膜不完整,已破裂
血红蛋白539L
血红蛋白量减少
尿蛋白(++)
溶血性黄疸
血清总胆红素855μmolt
量明昆增加
蚕豆病
红细胞198×1012/L
红细胞含量少
游离胆红素增加
尿胆红素(-)
尿胆素原(
肠肝循环增多
排尿呈酱油样色
蚕豆病简介
■蚕豆病是一种6-磷酸葡萄糖脱氢酶(G-6-PD)缺
乏所导致的疾病,表现为在遗传性葡萄糖δ-磷酸
脱氢酶(G-6-PD)缺陷的情况下,食用新鲜蚕豆
后突然发生的急性血管内溶血
易发人群
■多见于儿童,男性患者约占90%以上
临床表现
早期有恶寒、微热、头昏、倦怠无力、食欲缺乏
腹痛,继之出现黄疸、贫血、血红蛋白尿,尿呈
酱油色,此后体温升高,倦怠乏力加重,可持续3
日左右。与溶血性贫血出现的同时,出现呕吐
腹泻和腹痛加剧,肝脏肿大,肝功能异常,约
50%患者脾大。严重病例可见昏迷、惊厥和急性
肾衰竭,若急救不及时常于1~2日内死亡。
设计实验进一步
明确诊断
红细胞葡萄糖-6-磷酸脱氢酶活
性测定(紫外法)
(一)实验器材和试剂

恒温水循环紫外分光光度计,可见分光光度计,离心机。
2试剂
(1)/ L Tris-HCI MgC2缓冲溶液():称取
,Mgcl26H2○,加入160mL蒸馏水溶解,用HC
,然后加入蒸馏水至200mL。
(2)2mmoL烟酰***腺嘌呤二核苷酸磷酸(NADP):称取NADP
213mg,溶于10mL蒸馏水中。4C可保存20天左
(3)6mmoL葡萄糖-6—磷酸二钠(G6P-Na2):
G6P一Na22H2O,溶于10mL蒸馏水中。4℃C可保存20天左右。
(4)溶血剂:,10%,
6 mmol/L NADP+,加蒸馏水至总体积
200mL。
(5)血红蛋白氧化剂( Drabkin试剂):称取
K3 Fe(CN)6 , KCN , NaHCO3 ,
加蒸馏水至1000mL,置棕色瓶内避光保存,可保
存20天
(6)%NaC|,ACD抗凝剂。
(二)实验操作流程
■1、,放入含
mLACD抗凝剂的试管中,混匀。
抗凝血放入试管中,加入4mL预冷的生理盐水,
轻轻摇匀,2500min离心5min,倾去上清,重复
次
■2、溶血液的制备向红细胞沉淀中加入溶血剂
,震荡1min,4°C放置10mn以上。
以“空白”调“0”,1min后开始测340nm吸光度(A340),每
2min纪录吸光度一次,至10min止,比较每2minA值的变化情况,
若相近则表明酶促反应平稳。以10minA值的变化(△A340)计
算 NADPH的产量。
4溶血液中血红蛋白含量的测定取试管一支,按下表操作
试剂
体积
Drabkin(mL)

溶血液(mL)

混匀,室温放置15mn,以 Drabkin试剂调零,读取540nm
的吸光度(A540)。