文档介绍：中国海洋大学
硕士学位论文
κ-卡拉胶寡糖及其衍生物的制备与抗疱疹病毒活性研究
姓名:栾晖
申请学位级别:硕士
专业:水产品加工与贮藏工程
指导教师:牟海津
20090601
1
2
卡拉胶寡糖及其衍生物的制备与抗疱疹病毒活性研究摘要本文针对抗单纯疱疹病毒药物毒性相对较大、容易产生耐药株的缺点,以及硫酸多糖的广谱抗病毒活性,利用酶降解方法降解卡拉胶,制得ɡ汗糖。使用不同的磺化方法和脱硫酸基方法修饰卡拉胶寡糖,分别得到卡拉胶寡糖磺化衍生物和ɡ汗烟峭蚜蛩峄苌铩@玫ゴ筐逭畈《綡术研究卡拉胶寡糖及其衍生物的抗病毒活性,同时研究了它们的抗凝血活性。从而筛选出具有较高抗单纯疱疹病毒的卡拉胶寡糖衍生物。主要结果如下:⒗肕一瓴拿附到釱ɡ海梢宰ㄒ弧⒏咝У牡玫終拉胶酶解片段,使用乙醇分级、心汗私橹蚀炕螅玫讲煌子量的静卡拉胶寡糖。通过突Х椒ǚ治觯っ髅附夥ú换岣谋銴ɡ⒁訩ɡ汗烟俏T希捎貌煌约磷楹稀⒉煌从ξ露群筒煌从时间为变量,研究最佳的制备卡拉胶寡糖磺化衍生物和卡拉胶寡糖脱硫酸基衍生物的方法。实验发现,影响ɡ汗烟腔腔苌镏票傅淖钪匾5囊蛩厥欠从ξ露龋其次是反应时间,最后是试剂组合;而最能影响卡拉胶寡糖脱硫酸基衍生物制备的因素也是反应温度,其次是试剂组合,最后是反应时间。.卡拉胶寡糖磺化衍生物的最佳制备方法为使用氯磺酸一甲酰胺试剂组合,反应温度为,反应时间为;静卡拉胶寡糖脱硫酸基衍生物的最佳制备方法为使用无水二甲基亚砜一吡啶一,一苯四酸一氟化钠试剂组合,反应温度为⒗玫ゴ筐逭畈《綡术和细胞进行体外实验,将不同剂量的卡拉胶寡糖及其衍生物分别作用于病毒增殖的不同周期,共研究了卡拉胶寡糖及其衍生物对病毒的直接作用、对病毒吸附细胞的抑制作用和对病毒复制的抑制作用三个作用阶段。初步研究了卡拉胶寡糖及其衍生物的抗病毒活性及抗疱疹病毒的机理。实验发现,.卡拉胶寡糖及其衍生物对细胞毒性极低。.卡拉胶寡糖的结构。妫从κ奔湮
3
及其磺化衍生物对单纯疱疹病毒幸种谱饔茫饕L逑衷谝种撇《疚细胞的这一步骤;在相同浓度下,静卡拉胶寡糖磺化衍生物的抑制病毒吸附细胞作用明显强于卡拉胶寡糖。同时,对ɡ汗烟腔蚱浠腔苌锒裕一种寡糖对病毒吸附细胞的抑制作用随寡糖浓度的增加而增加。而ɡ汗烟脱硫酸基衍生物对单纯疱疹病毒廾飨宰饔谩⒍钥ɡ汗烟羌捌溲苌锏牟糠帜;蠲甘奔胁舛ǎ苑从乘堑目鼓;钚浴=峁砻鳎ɡ汗烟羌捌溲生物对内源性凝血系统具有一定的作用,并且这种作用随寡糖中硫含量的增加而愈加显著;而对外源性凝血系统无显著作用。关键词:豢ɡ汗烟牵幻附猓换腔煌蚜蛩峄坏ゴ筐逭畈《湍C冈间
4
,,琣琲甋瓾.—一,一℃,瓵琺——.:..瑀,.甌猚琤
5
甌,瑃籋甌、;
6
酵讯妣静寺签字吼细∥月侈日签字日期:九眵阵铝稳%签名:砺弦铆∥学位论文版权使用授权书独创声明汐本人声明所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。据我所知,除了文中特别加以标注和致谢的地方外,论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果,也不包含未获得蚱渌逃沟难换蛑な槭用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明本学位论文作者完全了解学校有关保留、使用学位论文的规定,有权保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和磁盘,允许论文被查阅和借阅。本人授权学校可以将学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索,可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。C艿难宦畚脑诮饷芎学位论文作者签名:学位论文作者毕业后去向:电话:确的说明并表示谢意。学位论文作者适用本授权书,.工作单位:字期签日师导通讯地址:邮编:,啊.‘,:
7
《究频牡湫痛恚谌类中感染较为普遍。猯感染可引起婴幼儿、儿童及成人的唇疱疹、角膜炎、疱疹性脑炎、脑膜炎等,腥究梢鹪绮⒘鞑⑺捞ァ⑻ザ我约爸力低下等。对于艾滋病、器官移植和恶性肿瘤等免疫抑制病人,常并发严重的腥。目前用于治疗单纯疱疹病毒的药物主要是阿昔洛韦,。自上世纪年代以来,阿昔洛韦逐渐被证明具有抑制单纯疱疹病毒的作用,包括免疫损伤者的粘膜皮肤腥尽脑炎和新生儿腥尽⑺缓痛答逭畹龋最重要的是原发性和复发性生殖器逭畈《靖腥尽8靡┪锝腽逭畈《靖腥的细胞后,与脱氧核苷竞争病毒胸苷激酶或细胞激酶,药物被磷酸化成活化型阿昔洛韦三磷酸酯,然后通过两种方式抑制病毒复制:①干扰病毒嗑勖福抑制病毒的复制;②在嗑勖缸饔孟拢朐龀さ腄链结合,引起的延伸中断。该药物选择性高,对正常细胞毒性小,至今仍是抗单纯疱疹病毒的首选药。但阿昔洛韦口服生物利用度仅为%%,长期使用有一定副作用,可引起痤疮、失眠、月经紊乱等,并可造成病毒胸苷激酶突变,产生耐药株。因此,有必要研发高效、低毒、不易产生耐药株的新药。近年来的研究发