文档介绍：中国协和医科大学
硕士学位论文
神经营养因子Neurturin在Vero细胞中的表达及生物学活性研究
姓名:马开利
申请学位级别:硕士
专业:生物化学与分子生物学
指导教师:孙茂盛;谢天宏
20080601
作者签名:————日期:论文使用授权声明论文独创性声明本论文是我个人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。论文中除了特别加以标注和致谢的地方外,不包含其他人或其它机构已经发表或撰写过的研究成果。其他同志对本研究的启发和所做的贡献均已在论文中作了明确的声明并表示了谢意。本人完全了解北京协和医学院有关保留、使用学位论文的规定,即:学校有权保留送交论文的复印件,允许论文被查阅和借阅:学校可以公布论文的全部或部分内容,可以采用影印、缩印或其它复制手段保存论文,保密的论文在解密后遵守此规定。日期:中国医学科学院北京协和医学院硕士研究生毕业论文
摘要神经营养因子是一类能够促进神经细胞存活、生长、分化的多肽分子,在神型猴做了前期研究工作,同时也为帕金森氏病的基因治疗研究打下了基础。关键词:神经营养因子,婧吮泶铮经系统发育、分化和损伤修复过程中具有重要作用。是一种新发现的神经营养因子,它能特异的作用于中脑多巴胺能神经元及运动神经元,对于以多巴胺代谢紊乱为特征的神经系统疾病如帕金森氏病的治疗具有重要的床意义,由于基因工程所制备的重组人岩酝üD云琳弦约霸谔内易被代谢成为无活性的代谢物而致半衰期短,需反复给药,副作用大,所以不能达到很好的治疗效果。因此,基因治疗将是一种有效而特异的治疗手段,因为其可以在靶部位长期稳定的表达目的蛋白,使活性蛋白直接在靶部位持续的发挥作用。本文就人婧吮泶镌靥宓墓菇ǎH綱赴⑸秆』竦梦榷ū泶细胞株,以及稳定细胞株所表达的的生物活性测定等进行了系统的研究。首先,构建的真核表达载体,经测序鉴定后体外扩增获得大量克隆。其次,用构建的/真核表达载体转染细胞,并通过筛选获得稳定表达的细胞株,阳性率达%以上。最后,对稳定细胞株所表达的的生物学活性进行测定。实验表明,其表达的在体外能够促进培养的鸡胚背根神经节长出神经突起,并能促进体外培养的大鼠胚胎中脑多巴胺能神经元的存活。本研究报道了稳定表达的细胞的获得,及其表达的对体外培养的中脑多巴胺能神经元的保护作用,此项工作为后续移植治疗帕金森氏病模细胞,稳定筛选,鸡胚背根神经节,多巴胺能神经元,保护作用中国医学科学院北京协和医学院硕士研究生毕业论文
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帕金森氏病是以中脑黑质多巴胺能神经元变性坏死、多巴胺合成减少为特征的神经系统退行性疾病。随着老龄化社会的来临,帕金森氏病的发病率正在日益增高,流行病学统计资料表明,岁以上的老年人口中,大约有群加入到该病的队伍中,目前帕金森氏病已经成为仅次于糖尿病、冠心病、脑血管病的严重影响老年人健康的疾病。对于帕金森氏病,现在临床治疗多以药物为主,由于神经细胞死亡后不能再生,目前临床上的治疗方法仅能缓解症状,不能从根本去除病因,也不能延缓疾病的进程,而现有的治疗帕金森氏病的药物长期疗效差,且副作用大,因此,人们在试图寻找新的治疗措施。研究表明,帕金森氏病的病理改变主要局限在黑质多巴胺能神经元的变性死亡,基因治疗的靶区明确,这非常有利于进行基因治疗的操作。目前基因治疗帕金森氏病等神经系统退行性疾病已成为研究的热点。神经营养因子是一类能够促进神经细胞存活、生长、分化的多肽分子,在神约敖褐氏赴葱陨窬Q蜃蛹易,萵共余种神经营养因子。通常情况下,机体内的神经细胞死亡之后不能再生,因此神经营养因子的发现为神经系统疾病如老,两鹕喜疭窬约∮Q涣,脊髓侧索硬化症纫约吧窬低乘鹕怂贾碌钠渌膊的治疗带来了新的希望,目前,神经营养因子已成为神经生物学、分子生物学及基因工程开发研究的热点。取甏哟笫蠼褐氏赴礏的无血清培养基中经浓缩、分离纯化得到一种蛋白质,它能激活体外培养的胚鼠腹侧中脑多巴胺能神经元摄取多巴胺,的人患有帕金森氏病,全国目前约有蚺两鹕喜』颊撸颐磕暧写罅康娜经系统发育、分化和损伤修复过程中具有重要作用。自年—诩ε咦橹惺紫确⑾稚窬ひ蜃以来,共发现了包括睫状神经营养因子,,脑源性神经营养因子,神经营养因子⋯年痴呆’中闰医学科学院北京协和医学院硕士研究生毕业论文匍吞,,·。■—一
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