文档介绍：西北师范大学
硕士学位论文
脂肪酶的生物印迹及其催化酯化反应的研究
姓名:周兴辉
申请学位级别:硕士
专业:细胞生物学
指导教师:曾家豫
2009-06
西北师范大学硕士学位论文脂肪酶的生物印迹及其催化酯化反应的研究周兴辉
摘要
己酸乙酯由于价值高,商业需求大,被广泛应用于饮料、食品和制药行业中。
天然的气味酯一般来源于植物,数量很少价格较高,况且气味因产地不同而不同。
己酸乙酯可以由酸与醇在较高的温度下化学催化反应制得。这种方法存在不少缺点,
比如副反应多,后处理困难,产品质量低。有机酶催化具有反应条件温和、副反应
少和环境污染小等优点,不仅具有重要的学术研究价值,而且还具有良好的应用价
值,可以克服上述缺点。本文分别用了游离酶,印记酶,交联印记酶,反胶束溶液
进行己酸乙酯的酶催化合成,发现活力和酶的稳定性有不同程度的提高。各部分介
绍如下:
1:研究了有机介质中CRL脂肪酶催化己酸与无水乙醇合成己酸乙酯的酯化反应
条件,并利用红外光谱、GC-MS、气相色谱等现代方法对合成的产物进行了表征。结
果显示,合成的产物为己酸乙酯,%,分子量为144。酯化反应在以正
庚烷为反应介质,反应温度为40℃,己酸与无水乙醇的摩尔比为1:, 己酸浓度为
mol/L的条件下,反应48小时后,%。
2:研究了反胶束中脂肪酶CRL催化合成己酸乙酯的反应,并对影响酶催化反应
的条件如反应介质、反应温度、溶液的pH值和水含量等进行了初步探讨。研究表明
酯化反应在以正庚烷为反应介质,反应温度为40℃,W0=8,,
酶的活性较有机相提高了3倍。
3:对交联印迹脂肪酶CRL催化合成己酸乙酯的反应,交联印迹酶的活性、稳定
性等进行了初步研究。结果表明,酯化反应在以正庚烷为反应介质,反应温度为40℃,
加水量为80µL,在优化条件下,酶的稳定性得到了较大的提高。
4:对印迹脂肪酶CRL催化合成己酸乙酯的反应,以及印迹酶的活性、稳定性等
进行了初步研究,并对合成的产物结构进行了表征。结果显示,合成的产物为己酸
乙酯,印迹酶活性的提高依赖于反应介质,含水量,以及印迹模板等因素。酯化反
应在以正庚烷为反应介质,反应温度为40℃,加水量为80µL,印迹模板为正辛酸的条
件下,印迹酶的活性较游离酶提高了6倍。
关键词: 脂肪酶, 生物印迹,反胶束,酯化反应
I
西北师范大学硕士学位论文脂肪酶的生物印迹及其催化酯化反应的研究周兴辉
Abstract
Ethyl Hexanoa are high valuable mercial demand pounds, and
are widely used in the food, beverage and pharmaceutical industries etc. Natural flavour
esters extracted from plant sources are often in short supply or expensive. Moreover,
flavour varies from region to region. Most of these esters can also be produced chemically
by acid-catalyzed condensation of an alcohol and an acid atelevatedtemperatures,however,
this way has many drawbacks, such as more byproduct, difficulty postprocessing and low
product quality. Because of the mild reaction condition, less side reactions and
environment pollution of enzyme-catalyzed reactions, utilization of enzymes is of great
interest both in economical and social benefits. Bioimprinted enzyme, crosslinked
imprited enzyme and enzyme synthesized in reverse micelle were used in this article. The
activity