文档介绍：广西医科大学
硕士学位论文
激素性股骨头缺血性坏死的蛋白质组学初步研究
姓名:梁晓南
申请学位级别:硕士
专业:创伤骨科
指导教师:赵劲民
20090501
激素性股骨头缺血性坏死的蛋白质组学初步研究中文摘要随着激素在临床上广泛应用,激素性股骨头缺血性坏死.,柰殉晌7谴瓷诵怨晒峭坊邓赖闹要原因,且有逐年增高的趋势。然而,姆⒉』粕胁幻魅罚外研究者纷纷从分子、基因水平对⒉』斫猩钊胙芯俊H欢细胞的功能是由蛋白质完成,蛋白质是疾病发生、发展、转归的执行者和参与者,也是疾病进程的信号。随着后基因组时代序幕的开启,蛋白质组学掀起了高潮,该技术已经广泛运用于骨科疾病的研究,虽然还处于起步阶段,但将蛋白质组学运用于芯坎皇R恢中路椒ㄓ胄履J健D前为止,对蛋白质分子与激素摄入致股骨头坏死的动态研究,未见报道。本研究首先运用三种常用方式建立P停孩倌诙舅赜爰に亓:嫌τ茫②单纯应用激素;③马血清与激素联合应用;通过比较三种方式的建模时间、成功率、骨坏死发生率等,以期寻找出适合于早期柘篐蛋白质组研究的理想动物模型。通过比较最终选择内毒素联合激素方法制作早期兔P停⒉杉煌奔涞堋周、的病变股骨头与正常股骨头组织。通过比较常规蛋白质提取法、透析法、丙酮沉淀法,寻找理想的提取骨组织蛋白质样品方法,并对提取的骨组织蛋白进行初次双向凝胶电泳,从而为今后牡鞍字首檠Х治鎏峁┣捌谘芯炕
第二部分激素性股骨头缺血性坏死蛋白质组学研究的第一部分激素性股骨头缺血性坏死动物模型的建立前期探索分析本部分研究的目的是通过比较三种不同建模方式,寻找适用于兔早期激素性股骨头缺血性坏死蛋白质组研究的模型建立方法,为进一步运用蛋白质组学技术对该病的相关研究提供理论基础和实验依据。实验选择健康成年雄性新西兰白兔,根据给药方式不同随机分成椤组即“内毒素に亍弊;组即“单纯激素组即“马血清に亍榧础岸哉铡弊。处理后观察动物各种生活情况,进行血液学、组织病理学检查、透射电镜学观察以及计算各组骨坏死发生率。通过比较,大剂量甲基强的松龙联合小剂量内毒素能诱导出典型的兔早期股骨头缺血性坏死模型,成功率高,死亡率低,重复性好。本部分研究的目的是通过比较常规蛋白质提取法、透析法、丙酮沉淀法,寻找理想的制备骨组织蛋白质样品方法,并对提取的骨组织蛋白进行初次双向凝胶电泳,从而为后续蛋白质组学分析提供前期研究基础。实验对同~份兔骨组织标本采用常规蛋白质提取法、透析法、丙酮沉淀法分别提取蛋白,所提取的蛋白按相同上样量,同时经甈缬尽染色、脱色、扫描、分析,并对实验提取的骨组织蛋白进行初次双向凝胶电泳。通过比较,优化的丙酮沉淀方法所提取的骨组织蛋白电泳条带较清晰,蛋白条带也明显增多。从双向凝胶电泳图谱中观察到所得两块图谱中的蛋白质点分别为龊个,分布模式相似,说明重复性较好,可为今后牡鞍字首檠а芯刻峁┫喙氐募际跗教ā激素性股骨头缺血性坏死的蛋白质组学初步研究
结论〖亮磕诙舅亓:洗蠹亮考に啬苡盏汲龅湫凸晒峭啡毖P曰邓馈冉虾笕衔13恋矸苈隳壳肮亲橹鞍椎奶崛。梅椒ㄉ杏不足之处,因此仍期望能有更好的方法进行优化或替代。鞠钅坑涤薪虾玫牡鞍字首檠喙丶际跗教ā关键词:兔;激素性股骨头缺血性坏死槐冉系鞍字首檠В凰向凝胶电泳一患す饨馕隼胱踊尚惺奔渲势甌。激素性股骨头缺血性坏死的蛋白质组学初步研究
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英文缩写英文全称中文全称过硫酸铵骨髓间充质干细胞考马斯亮蓝染色环丙基甲醇胶原诱导性关节炎蚰旱缬猟,曲一二维液相色谱一离子阱串联质谱二乙基焦磷酰胺差异凝胶电泳二硫苏糖醇增强化学发光乙二胺四乙酸电喷雾质谱成纤维样滑膜细胞曲一葡萄糖胺聚糖糖皮质激素高密度脂蛋白等电聚焦电泳低密度脂蛋白固相梯度../狹猟—瓺猚猟硕士论文激素性股骨头缺血性坏死的蛋白质组学初步研究
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