文档介绍:苏州大学
硕士学位论文
LyGDI在肿瘤细胞辐射凋亡敏感性中的作用与P53调控研究
姓名:董玉金
申请学位级别:硕士
专业:放射医学
指导教师:周新文
20090501
谥琢鱿赴涞蛲雒舾行灾械淖饔与骺匮芯中文摘要表达癆对辐射诱导细胞凋亡和细胞放射敏感性的影响并分析其机其正确性;脂质体法转染真核细胞竺庖哂〖<觳馊诤系鞍椎谋泶铮庖咦霉菇ǔ晒Φ奈榷ㄗH緇及虻腖赴<测转染苑溆盏剂街窒赴蛲雎实挠跋欤骄科涠韵赴派涿舾行缘挠跋欤凋亡并诱导狭眩晃榷ㄗH緇及腖赴溆盏嫉牡目的:构建癆的带有荧光标记的真核表达载体并分析外源性制;研究恢复细胞鞍妆泶锒韵赴溆盏嫉蛲黾癓的影响。方法:杓苐及蛏舷掠我铮琍扩增基因片段,.—真核表达载体。经酶切、⒉庑蜓橹化观察融合蛋白在细胞内定位;⑽榷ㄗH鞠赴辏、免疫印迹法验证;生长曲线法检测细胞增殖能力的的变化;湎哒丈后,克隆法检测放射敏感性的变化;流式细胞术检测细胞凋亡率的改变,免疫印迹法检测相关蛋白的表达;免疫印迹法检测相关蛋白的表达。结果:测序证明基因序列完全正确,免疫印迹和免疫荧光染色检测到目的蛋白表达;恢复细胞鞍椎谋泶镆种屏薒赴脑鲋衬芰Γ俳溆盏嫉南赴亡率上升,辐射处理后观察到融合蛋白断裂成相对应的癆蛋白;稳定转染腁赴溆盏嫉牡蛲雎噬仙黾酉赴派涿舾行裕诟孟胞受到湎哒丈浜到小时可以观察到鞍锥狭殉葾蛋白。结论:谥琢鱿赴涞蛲雒舾行灾械淖饔糜隤调控研究
晒菇ù蠫绿色荧光标记的瓺及瓺狝真核表达载体;指碙赴腜表达抑制细胞增殖能力,增加细胞放射敏感性并发现庠葱员泶锟梢杂盏糒断裂;甃在、两种细胞中外源表达后能够增加辐射诱导细胞凋亡敏感关键词:真核表达载体;辐射敏感性;细胞凋亡;籐;作指导教师:周新文性:者:董玉金谥琢鱿赴涞蛲雒舾行灾械淖饔糜隤调控研究中文摘要
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研究生签名:.亟:盒研究生签名:童奎:玺导师签名:嫣疡期:主塑:苎兰学位论文独创性声明学位论文使用授权声明苏州大学学位论文独创性声明及使用授权声明期:立塑:兰:兰期:之:查兰本人郑重声明:所提交的学位论文是本人在导师的指导下,独立进行研究工作所取得的成果。除文中已经注明引用的内容外,本论文不含其他个人或集体已经发表或撰写过的研究成果,也不含为获得苏州大学或其它教育机构的学位证书而使用过的材料。对本文的研究作出重要贡献的个人和集体,均已在文中以明确方式标明。本人承担本声明的法律责任。苏州大学、中国科学技术信息研究所、国家图书馆、清华大学论文合作部、中国社科院文献信息情报中心有权保留本人所送交学位论文的复印件和电子文档,可以采用影印、缩印或其他复制手段保存论文。本人电子文档的内容和纸质论文的内容相一致。除在保密期内的保密论文外,允许论文被查阅和借阅,可以公布ǹ论文的全部或部分内容。论文的公布ǹ授权苏州大学学位办办理。日
言引一、肿瘤现状及放疗在肿瘤治疗中的作用、机制人,每年约有蛉怂烙诙裥灾琢觥8晔澜缥郎橹%,恶性肿瘤已经成为致人类死亡的主要原因之一。现在公认的是肿瘤的发生是一疗研究上来讲,抑制癌细胞的增殖只能延缓肿瘤的进展,不能治愈肿瘤,而诱导癌细放射治疗是当今肿瘤治疗经典的三大支柱方法质酢⒎帕啤⒒之一,相对的肿瘤病人需用放疗,柿媳砻鳎涸ザ裥灾琢隹芍斡渲惺质踔斡ィ放疗可以治愈%,化疗和其它疗法约ィ纱丝杉帕圃谥琢鲋瘟频闹匾W饔谩亡来实现对肿瘤细胞的杀伤。放疗使肿瘤细胞的芩鹕耍鹕说腄与蛋白结合,启动颍瓜赴隚谏ひ种撇⒂盏妓鹕搜现氐南赴氲亡状态【俊L岣叻帕菩实姆椒ㄔ蚴窃谡W橹赴褪艿那榭鱿略黾又琢鱿赴姆电离辐射致细胞死亡分为细胞凋亡和增殖死亡两种类型,其靶点均为6而是细胞修复哪芰Γ庥秩【鲇谙赴幕蛱氐恪5毕赴鱿諨损伤时,目前肿瘤疾病已成为多发病、常见病。全世界每年约有万新发恶性肿瘤病和美国临床肿瘤学会的有关资料:全世界恶性肿瘤死亡约占总死亡总数的个多因素、多阶段、多步骤的复杂的过程,其病因和发病确切机制迄今尚未明确,但可以肯定的是肿瘤不仅是细胞增殖和分化异常的疾病,同时也是细胞凋亡异常的疾病。肿瘤的发生、发展是细胞过度增殖和凋亡下降的结果,肿瘤的大小取决于癌细胞的增生及细胞死亡的平衡,而肿瘤的转移能力也与细胞凋亡率下降有关。从肿瘤的治胞的凋亡才能使肿瘤缩小乃至消失。故研究肿瘤细胞的凋亡分