文档介绍：天津医科大学
博士学位论文
人脑胶质瘤EGFR和p53基因表达以及EGFR反义RNA与p53基因联合
转导对胶质瘤生长抑瘤作用的研究
姓名:董伦
申请学位级别:博士
专业:神经外科学
指导教师:浦佩玉
20040501
缩略语鼠胶质瘤细胞转染空载质粒的胶质瘤瘤细胞联合转染空载腺病毒和空载质粒的胶质瘤细胞转染反义质粒的胶转染俨《镜腸褐柿细胞质粒的胶质瘤细胞焦碳酸二乙脂二甲基亚砜溴化乙锭乙二胺四乙酸人胶质瘤细胞转染空载质粒的褐丝苏氨酸激酶互补去离子蒸馏水转染空载腺病毒的胶质质瘤细胞联合转染俨《竞头匆细胞培养液胎牛血清纤维母细胞生长因子—./—瓵狿·‘畇
”转染空载腺病毒的质瘤细胞柿5腡胶质瘤细胞转染反义质粒的胶质瘤细胞质粒的褐柿鱿多形性胶质母细胞瘤蛋白激酶受体酪氨酸激酶联合转染空载腺病毒和空载转染俨《镜腡胶联合转染俨《,新霉素狝——琋,甆‘
羌谆饣淄末端脱氧核酸转移酶介导的三磷酸脱氧鸟苷缺口末端标记法
中文摘要.%,其中恶性胶质瘤达%,预后差,病死率高。尽管目前临床采用的综合治疗手段ㄏ晕⑹质酢⒏呒亮康姆帕坪突不断有所改进,但疗效仍不理想,随着肿瘤生物学和分子遗传学的进展,人们逐渐认识到:和人体其他部位的肿瘤一样,胶质瘤发生发展主要是原癌基因的激活与抑癌基因的失活并由此产生一系列基因异常和动态演进的结果,其中原癌基因的激活和抑癌基因耐槐涫Щ钣虢褐柿龅姆⑸⒎⒄辜捌涠哉锒稀⒅瘟坪驮目前,来自欧美学者的研究认为,扩增、突交与过表达和Щ可能代表形成恶性胶质瘤的两种不同的分子途径。低恶度星型细胞瘤进展到间变性星型细胞瘤乃至继发胶质母细胞瘤其早期主要的分子事件是变,而原发胶质母细胞瘤中的早期主要分子事件是扩增和/或过表达,甚有认为这两个基因变化在原发和继发胶质母细胞瘤中是相互排斥的。根据这些基因变化特点将胶质母细胞瘤区分为原发和继发胶质母细胞瘤已经成为及褐柿龅谋泶锛巴唤唤醒芯浚⑾止说投穸刃切拖赴鲋械膒基因突变率仅达%,远低于国外报告的%一%:而原发胶质母细胞瘤中细胞瘤中达%,±硌Р异是源于种族的不同抑或其他原因尚不清楚,因此进一步研究这种差异是开基因表达水平及其变化规律,已经有一些学者进行了探讨,但是两者共表达脑胶质瘤是最常见的原发性颅内肿瘤,占成人颅内肿瘤的.’后的关系尤其受到关注。分子生物学应用于临床病理的例证并被广泛接受。⒔褐誓发和研制针对性治性措施的基础。鉴于及虮泶锏淖橹匾煨裕泄厝肽越褐柿龅腅雙尤其是槐溆隕泶锏墓叵担约傲秸哂胫琢霾±砝嘈汀⒃鲋郴钚浴
生物学行为等方面的研究,国内则未见报道,国外仅见个别报道。而两者在系及与肿瘤病理类型、恶性程度和增殖活性等生物学性状的关系,并对星细胞起源的胶质瘤进行了单独的分析,为胶质瘤基因治疗优选目的基因提供实合基因治疗胶质瘤优选靶的之一的可行性;为最终联合基因治疗胶质瘤提供人脑胶质瘤表皮生长因子受体和鞍谆虮泶镉胂赴鲋对例不同恶性程度的胶质瘤、鎏逋舛裥越褐柿鱿赴怠例正常脑组织采用免疫组化技术检测及鞍妆泶铮徊捎肧咏弧法确定蛲槐浼捌湮坏悖⒀芯縀皃基因共表达及两者的相互一、入脑胶质瘤表皮生长因子受体的基因扩增与过表达及免疫组化检测发现及蛋白表达水平均随胶质瘤恶性程不同肿瘤病理级别类型尤其是在不同胶质母细胞瘤类型中的表达情况及相互关系对肿瘤的病理分类及病情发生、发展及预后有重要的影响。为了进一步阐明人脑胶质瘤中与虮泶锕媛杉傲秸呦嗷ス叵担究翁舛例不同恶性程度的胶质瘤及鎏逋舛裥越褐柿鱿赴担例正常脑组织,采用分子生物学技术通过杂交、—癉测序等方法对及幕蛞斐1泶锿苯屑觳猓治鏊堑谋浠湍谠诹验依据。并通过体内、体外试验探讨反义基因和野生型蜃魑A实验依据。第一部分活性的相关性研究—觳釫蚶┰銮榭黾癮泶铮徊捎肞—及庑蚍度的增加而增加。、弧縡Ⅱⅱ艏队胝D宰橹一级问均有显著差异队擘艏吨渚廾飨圆钜。D宰橹也无明显表达;在胶质瘤中的表达阳性率和表达水平也随肿瘤恶性程度增加而增加,;各级别相互问比较结果,,蛋白表达水平与病理分级关系。.欢Ⅳ级高于
细胞系中扩增率高于正常脑组织和胶质瘤狪蹲椤=褐柿鯥、Ⅳ和在Ⅳ级、丁—级胶质瘤中,过表达分别为,.%,.%,.%,有欣┰觥T冖艏吨校⒔褐誓赶赴鲋蠩泶锟纱有扩增的例中均有过表达,但其余例过表达无扩增。显示扩增均有过表达,但过表达的部分标本并无扩增,的—觳也证实了该结果。本组资料显示,在ⅱ艏兜慕褐柿鲋蠩鞍坠泶锓二、人脑胶质瘤蛲槐浼皃蛋白表达D宰橹痯无明显表达;诮褐柿鲋械幕勐屎捅泶锼接互间比较结果ⅱ艏陡