文档介绍：天津医科大学
硕士学位论文
肺炎克雷伯菌β-内酰胺酶基因型研究
姓名:李静
申请学位级别:硕士
专业:病原生物学
指导教师:钟启平
20100501
中文摘要酶,应用改良匝椤⒚柑崛∥锶匝楹虴匝槎苑窝卓死撞进行碳青霉烯酶筛选,提取质粒髂0澹捎镁酆厦噶捶从和三种基因型,结果显示三种基因型的检出率分别是虴基因,阳性率为因,阳性率为.%;同时携带忠陨匣颍粜月饰ァK婊∪株经觳馕狢型、闟型、闠型扩增阳性产物进行庑炎克雷伯菌屠┰霾锟扇范ㄎ猄型,与源自肺炎克雷伯菌登录号:嗨菩宰罡撸ネ矗籰株肺炎克雷伯菌屠┰霾可确定为型,与源自大肠埃希菌菌株锹己牛篎相似性最高,为ネ础6陨鲜攴窝卓死撞懈牧既匝榧觳獠鶤条带,随机选取昃璓检测为虯富蚶┰鲅粜圆锝蠨测序分析,测序结果经基因库查询和比对,发现肺炎克雷伯菌的┰霾镉牖蚩鈈同源性为登录号:珼测序酶提取物三维试验对攴窝卓死撞刑记嗝瓜┟干秆>酆厦噶捶从觳馓记嗝瓜┟富颍⒍圆糠諴扩增产物进行庑蚍治觥=峁目的研究天津医科大学总医院临床分离的肺炎克雷伯菌超广谱荒邗0访⒅柿=榈糀讣疤记嗝瓜┟∈匝槌跎覆鶤妇辏牧既匝榧觳釧序列分析确定⒅柿=榈糀酶及碳青霉烯酶的基因型。结果对头孢西丁耐药株肺炎克雷伯菌进行蛐图觳猓奔觳釩、荒邗0访富颍粜月饰ィ籘型一内酰胺酶基分析,结果显示攴窝卓死撞鶦型扩增产物均属型,经基因库查询和比对,与源自大肠埃希菌菌株锹己牛篎相似性最高,为%同源;攴窝卓死撞鶶型扩增产物可确定为型,与源自肺炎克雷伯菌锹己牛篏相似性最高,为ネ矗株肺菌株,采用聚合酶链反应奔觳釴三种基因型,随机挑耿部分阳性菌株进行庑蚍治黾觳庵柿富蛐捅稹=峁允荆焊良三维试验检出株酶菌株,经┰昃处出现阳性分析显示扩增出的基因属于型。应用改良匝椤匝楹天津医科人学硕宦畚.%;
关键词:肺炎克雷伯菌超广谱邗0访窤显示在我院共收集到甓悦缆夼嗄夏鸵纸片扩散法姆窝卓死撞琍同时检测四种基因型,结果显示昃鳮型碳青霉烯酶基因,昃鳬型金属内酰胺酶基因。随机挑取昃璓检测为吞记嗝瓜┟富蚶┰鲅粜圆锝蠨测序,序列分析发现肺炎克雷伯菌的┰霾镉牖蚩鈈同源性为%锹己牛篍,庑分析显示扩增出的基因属于型,同时对昃璓检测为吞记嗝烯酶基因扩增阳性产物进行庑颍蛄蟹治龇⑾址窝卓死撞腎扩增产物与基因库葱晕登录号:珼测序分析显示扩增出的基因属于汀=崧鄯窝卓死撞鸵┗圃嚼丛礁丛樱⑶页识嘀耐药。产负虯甘欠窝卓死撞钪饕5牧街帜鸵┗疲珽基其次为停毙种以上基因比率较高。基因分型全部为汀6蕴记嗝瓜├嗄鸵┑,本研究为临床感染药物的选择和医院感染的控制提供了依据。附鹗裘富蛐天津医科人学硕十学位论文因分型以汀型为主,
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研究现状、成果肺炎克雷伯菌是临床分离率较高的条件致病菌,当机体免疫力下降或应用免疫抑制剂等原因,可引起感染,治疗这类感染的主要抗菌药物是第三代头孢菌素。随着三代头孢菌素使用同益增多,细菌耐药率逐年增加,其主要耐药机制是细菌产生新荒邗0访福饕0ㄖ柿=榈的超广谱荒邗0访..,和质粒介导的,而近年来在世界各地已经出现的产负金属酶的肺炎克雷伯菌,给临床治疗带来了很大困难。粲贏掷郃类、分类海珽是由细菌质粒介导的能水解氧亚氨基邗0股兀⒖杀籅一内酰胺酶抑制剂如克拉维酸所抑制的一类邗0访浮Q跹前被鵳内酰胺抗生素包括第三代头孢菌素如头孢他啶、头孢曲松、头孢噻肟和单环酰胺类抗生素如氨曲南,第四代头孢菌素如头孢匹罗和头孢吡肟,这些抗生素都有一个含氧亚氨基基团的侧链。材芩飧骼嗲嗝顾兀饣钚缘陀诠谱酶。酶属于分类唷蚿一内酰胺酶,酶可分为染色体型和质粒介导型。质粒介导的酶特点是它能水解一代、二代、三代头孢菌素,头霉素,氨曲南。外膜蛋白丢失的菌株可出现对碳青霉烯类抗生素耐药。与染色体介导的酶不同,它可以持续高水平表达,且可通过转化、接合等方式转移给其它菌,造成耐药性广泛传播S捎诜窝卓雷伯菌中无染色体携带的基因,从肺炎克雷伯菌中检测到的酶,只能由其染色体外遗传物质如质粒携带的基因编码。因此,从肺炎克雷伯菌中检测酶具有更为重要临床意义。与煌氖嵌头霉烯类抗生素如头孢西丁高水平耐药,并不被克拉维酸所抑制珹内酰胺酶引起革兰阴性杆菌对第三代头孢菌素和单环类化合物耐药。甘粲贏掷嗟腁类、分类的亚群,是一种由质粒介导的丝氨酸荒邗