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⋯名:盔一新繇鉴盟嗍避年』月』日日期:盛年厶』日论文独创性声明论文使用授权声明人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。论文中除了特别加以标注和致谢的地方外,不包含其他人或机构已经发表或撰写过的研究成果。其他同志对本研究的启发和所做的贡献均已在论文中作了明确的声明并表示了谢意。作者签名:徐州医学院硕士学位论文本人完全了解徐州医学院有关保留、使用学位论文的规定,即:学校有权保留送交论文的复印件和电子文档,允许论文被查阅和借阅;学校可以公布论文的全部或部分内容,可以采用影印、缩印或其它复制手段保存论文。保密的论文在解密后遵守此规定。
日期:日期:趟年』月』日论文审阅认定书研究生奎拉在规定的学习年限内,按照研究生培养方案的要求完成了研究生课程的学习,成绩合格;在我的指导下完成本学位论文,经审阅论文中的观点、数据、表述和结构为我所认同,论文撰写格式符合学校的相关规定,同意将本论文作为学位申请论文送专家评审。导师签名徐州医学院硕士学位论定
慢病毒载体介导的及联合韵乐琢鱿赴饔玫难芯中文摘要目的构建含有人可溶性虻闹刈槁《驹靥澹鄄在不同靶细胞中的表达,并观察联合三氧化二砷韵赴芷诒浠和诱导细胞凋亡作用的影响。方法构建携带人的重组慢病毒载体,在体外感染正常人肝细胞.、人胚肺成纤维细胞、人胃癌细胞⑷艘认侔┫赴鸖,应用酶联免疫吸附实验兰踫鞍自谥琢鱿赴械谋泶铮采用觳庀赴蛲雎始跋赴芷诘谋浠结果成功包装出含有基因的重组慢病毒,滴度可达.×/;重组慢病毒转导使在消化道肿瘤细胞中高效表达,联合捎导蚐细胞凋亡,而对一等人正常细胞无明显诱导凋亡作用。结论成功构建了重组慢病毒表达载体./昂笤谔逋饪梢有效感染人胚肾细胞、、细胞并表达有活性的,联合盏贾琢鱿赴蛲鲎饔孟灾=徊浇刑迥谑笛檠芯康於了基础。关键词慢病毒;;换蛑瘟徐州医学院硕士学位论文
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F裎V梗谌死喾⑾諸受体家族共有龀稍保═/、前言消化道肿瘤是人类常见的恶性肿瘤。据统计,,每年约有万人死于胃癌,其中几乎三分之二的病例发生在发展中国家,仅中国就占%;胰腺癌的发病率近年来逐年上升,⒒坪头帕频龋捎谌诊时多属中、晚期,效果十分有限。近年来改良的分子生物学技术和对肿瘤发生机制的日趋了解使基因治疗成为很有前途的治疗方法之一。基因治疗是一种以预防和治疗疾病为目的的人类基因转移技术,是以改变人的遗传物质为基础的生物医学治疗方法。随着对恶性肿瘤发生发展分子机制研究的不断深入,恶性肿瘤的基因治疗已成为当前肿瘤研究的热点。基因转移载体是基因治疗的核心技术,目前应用较多的病毒载体主要包括逆转录病毒、腺病毒珹、腺相关病毒、慢病毒、单纯疱疹病毒等。其中,慢病毒是逆转录病毒的一个亚科,能够感染分裂细胞和非分裂细胞,可以携带更大的基因片段,能够有效地克服基凶沉默,在感染宿主细胞后,病毒基因组可以整合到宿主细胞的染色体上并长期稳定表达,不易诱发宿主免疫反应,因而被发展成为重要的转基因载体,而且稳定包装细胞系的建立使得慢病毒的生产更为简便。经逐步深入改造的慢病毒载体系统目前已成为基因治疗研究的重要工具。肿瘤坏死冈子相关凋亡诱导配体—是易逯械某稍保蚱淠芴匾煨陨鄙酥琢鱿赴叶哉O赴抻跋於倍受关注。且恢諭涂缒さ鞍祝个氨基酸组成,在多种组织细胞广泛表达,其胞外区域断裂后形成一可溶性分子,即可溶性/和护骨素徐州医学院硕士学位论文,/
神经胶质瘤、胰腺癌等裸鼠移植瘤都已得到证到。,【縪近年来有许多研究均表明膜结合型和可溶性寄苡盏级嘀种琢鱿赴发生凋亡而对大多数正常细胞无影响V刈榭扇苄訲瑀悄壳爸琢鲋瘟频淖罹呦M拿庖叻肿又弧8杈哂猩锘性的苡盏贾琢鱿赴蛲觯种浦琢鼋梗谌私岢Π⒍喾⑿怨撬枇觥但是,重组瑀蛋白在动物体内容易被蛋白酶降解,半衰期短,需要较大的剂量才能抑制肿瘤的形成和发展。幕因治疗可克服上述缺陷,已受到广泛关注。已有学者利用逆转录病毒、慢病毒、腺病毒、腺相关病毒作为载体,对肺癌、肝细胞癌和宫颈癌等恶性肿瘤的基因治疗进行了研究【另有研究发现一些肿瘤细胞株和原发肿瘤对诱导凋亡有抵抗作用淇赡芑瓢―、泶锶狈Α⒂掌芴宓墓泶铩⑵舳拥募谆一些凋亡抑制蛋白、等的过表达、.的激活等;同时研究发现联合和化疗或放疗在体外、体内均有协同抗肿瘤作用,并能够减轻或消除这种抵抗作用三氧化二砷,珹壮婆#驯怀晒ττ糜诩毙早幼粒细胞白血病的治疗。哂泄惴憾捞氐目拱┗疲昀吹男矶喙谕研究均表明允堤逯琢鲆灿幸欢ǖ闹瘟谱饔。本实验拟构建含有人基因的重组慢病毒载体,在体外实验中观察其对