文档介绍：Ｓf9培养要点:
温度:2７—2８摄氏度
pH：，sf9最适的ｐH6。2，随培养时间的延长,Ｐh值会增加
传代时间:７2h(三天左右）
细胞来源:Sf9(货号B825—01）和Sf21（货号B８２1—01）细胞系是传统的用于杆状病毒表达的细胞系,。这两株细胞衍生于ＩPLBSF—２1细胞系，来源于秋蝇蠕虫(草地夜蛾）蛹的卵巢组织。（以上来自iｎviｔｒｏｇen）
细胞特点:规则的带有颗粒球形。贴壁紧。
标准条件的定义：
培养最低密度:×106／ml（健康对数生长期细胞活率至少应不低于90%。活率低于90％细胞不是在最佳条件下培养不能用于实验）1×106/ｍL将出现对数生长状态
传代培养：传代培养需将细胞调整到维持对数生长状态和最大活率。
贴壁培养: 贴壁细胞传代需在细胞长成单层（如下定义)然后1:５(细胞体积:最后培养基体积)稀释维持对数生长。形成单层细胞可以传代培养
悬浮培养:×106－2．5×106细胞/×106-1．0×106细胞／mL进行悬浮传代。确保传代细胞密度不高于４×106个/mL或保持密度高于１×106个/ｍL以达到对数生长状态。
Sf9悬浮培养所需要的细胞数
培养基：ｓf－900 Ⅲ SFM（添加2％的血清减小感染过程中蛋白水解量）
培养瓶与培养体积:
冻存：一旦细胞系建立且倍增规律则可以进行冻存。细胞需达到90%活率和80—9０％融合的要求（如：低代次)推荐冻存几管。当融解细胞，它将会达到最佳使用状态。
1。 用细胞计数板计数细胞。需要足够的如上表所示密度的细胞冻存2-4管。细胞可是悬浮或贴壁培养；
2。 将无菌冻存管立于冰上，做好标记；
3。 室温４00—6００×g离心10min。移除上清。
４. 以给定的密度在冻存液中重悬细胞；
5． 移取1mL细胞悬液置于无菌冻存管中；
６。 置于-２0℃１ｈ,然后移至－８0℃２４—48h;
7． 储存于液氮中。
转染的细胞：需要的是对数期的细胞＞９5％发育能力，可以完成成功的转染.
载氧:对于最优生长条件