文档介绍：第卷第期南京医科大学学报自然科学版
年月· ·
基因在大鼠胚胎心脏中的表达
孙凤荣龚杰钱玲梅孔祥清盛燕辉杨荣曹克将
南京医科大学第一附属医院心脏科江苏南京
摘要目的检测基因在大鼠胚胎心脏中的蛋白表达变化。方法取大鼠胚胎、、天心脏应用
、免疫组化的方法进行半定量、定位分析。结果免疫组化显示基因在房室肌、心内膜、心内膜垫、房室瓣及大动脉
根部均有表达。显示在胚胎天心脏中基因已有较高表达在胚胎天表达明显上调胚胎天时表
达又有所下降。结论随大鼠胚胎心脏的生长发育呈动态表达与心脏发育密切相关。
关键词基因大鼠胚胎心脏
中图分类号文献标识码文章编号

基因家族是一类锌指蛋白转录因子结步认识其在胚胎心脏发育中的作用。大鼠胚胎组织
合的序列为进化上非常是胚胎发育研究领域中被广泛采用的实验材料
保守。该家族目前共有个成员~ 是一组其中第、、天为心脏发育关键时间点因
组织特异性表达的转录调节因子在多种组织的分此本研究选取第、、天大鼠胚胎心脏作为检
化和发育中起重要作用。其中主要在心脏、测的时间点。
肠及生殖腺中表达。目前对于在心脏中的
材料和方法
研究集中在其上下游基因及动物模型的研究而
对于其在心脏上的表达情况的研究也一直停留在材料
心脏发育早期的观察。年月~ 年月成年大鼠只~ 周龄其中雄鼠
本试验通过免疫组化、方法对只~ 雌鼠只约由南京医科大
在胚胎心脏的定位及表达变化做一了解以更深一学动物中心提供。大鼠共分为两大组任取只雌
鼠只雄鼠为一大组。一组做另一大
基金项目国家自然科学基金资助项目江苏组做组化。分别在孕、、天取胚胎心脏其中
省自然科学基金资助项目、孕天用于组化的取整胚。雌雄按∶合笼清
通讯作者晨见脱落阴栓视为天。
第卷第期
· · 南京医科大学学报年月
实验试剂及免疫组化实验试剂β吸光度值之比进行半定量分析。
中小鼠抗大鼠一抗购自美国公统计学方法
司兔抗小鼠二抗购自北京中杉公司免疫组数据以± 表示经统计软件分
化试剂盒、显色试剂盒均购自武汉博士德公司。析方差齐性检验后采用检验表示有
方法统计学意义。
取材
结果
取孕、、天母鼠引颈处死分离出胚胎
显微解剖镜下用显微镊子取出心脏后迅速置于液在大鼠胚胎天、天及天心脏
氮中。中的定位表达
免疫组化检测胚胎心脏的定位表达免疫组化结果显示胚胎天在心
胚胎心脏经多聚甲醛固定、石蜡包埋后连续房心室的心肌细胞心内膜细胞、心内膜垫组织及
切片片厚约μ免疫组化简要过程切片常规脱大动脉根部均有表达在胚胎天在房室肌室
蜡水化微波抗原修复过氧化氢消除内源性的过间隔等处的心肌心内膜瓣膜处表达明显胚胎
氧化物酶蒸馏水漂洗漂洗一抗∶天时仍表达于以上部位但在流出道及大动脉根部
℃孵育漂洗以后操作按试表达不明显图封二。
剂盒说明。室温显色流水冲洗苏木精复染蛋白在大鼠胚胎心脏、、天的
脱水透明并封片。另以缓冲液代替一抗作为表达水平
阴性对照。在大鼠胚胎心脏、、天的蛋白
检测胚胎心脏蛋白水相对表达量分别为± ±
平的表达± 各组间的比值差异有显著
取心脏组织加冰裂解液成分性表图封二蛋白