文档介绍：四川大学硕士学位论文题目芒壶嚣搓酲丝星塞盥岔匿纯焦塑壁廑鲤塞凌生塑些堂皇盆王生毖堂錾敛援产壳聚糖酶真菌的筛选与绿僵菌固态发酵专业指导教师姓名盒学校代码作者堑五年五月八日学号
产壳聚糖酶真菌的筛选与绿僵菌固态发酵产壳聚糖酶以及酶的分离纯化和性质研究研究生导师余蓉教授四川大学华西药学院生物制药教研室摘要张涛几丁质是产量仅次于纤维素的第二大类多糖。壳聚糖是几丁质的脱乙酰产物。壳聚糖降解后产物壳寡聚糖具有较高的溶解性和生理活性,在食品工业、农业、医疗方面有着广泛的应用价值。目前,酶解法生产壳寡聚糖成为研究热点,其中以专一性的壳聚糖酶降解壳聚糖的研究进展最快。但是目前发现的菌株壳聚糖酶产量较低,生产成本较高,且酶的稳定性方面还有较多缺陷,不能适应大规模工业生产的需要。因此,筛选产壳聚糖酶能力更强的菌株,寻找具有工业化潜在应用价值的新酶源,仍是目前研究的一个重要方向,有着很大的应用研究价值。本研究比较几种丝状真菌产壳聚糖酶的活力大小,筛选出产酶活力最高的贵州绿僵菌Mü怨笾萋探┚烫⒔吞跫难究,确定了最佳发酵条件为:当以麸皮:黄豆粉为作为培养基,添加タ蔷厶牵钍实T次%鹗紁.⒔臀露任℃~℃,接种量为嘌小时产酶活力最高。。添加氨基葡萄糖对菌株生长有促进作用,但是对产酶有抑制作用。该菌株在发酵时,每克干培养基酶活力可达.±四川走学碰士学位论文
本文用缓冲液对发酵后培养基进行抽提,采用捅7国内外未见报道。对样品理化性质研究表明,该酶在。韵掠薪虾的稳定性,在弱酸性酶的半失活温度为℃。该壳聚糖酶降解壳聚糖反应最适温度为甃畆ā岸愿妹赣星苛乙种谱饔茫琈啊啊啊啊愿妹赣薪锨恳种谱饔茫珻岸云溆薪锨考せ钭饔谩8妹甘且恢痔够微弱降解徒禾寮卓撬兀钍实孜镂M岩阴6任サ慕禾蹇关键词;绿僵菌固态发酵壳聚糖酶分离纯化性质研究级沉淀,.层析得到了活性较高的壳聚糖酶。经阏邸征实为纯品单亚基蛋白,比活达/。每克于培养基可获壳聚糖酶炕钚曰厥章饰ィ傅鞍追肿恿课,.娜芤褐幸蚕嗟蔽榷ā1N。。值为疞,!,含糖量约为.%。该酶不能降解片状甲壳素和纤维素,能聚糖。、四川大学硕士学位论走、
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贵州绿僵菌固态发酵产壳聚糖酶的分离纯化及酶学性质的研究降解、良好的生物容性和成膜性等优良特性,在化工、食品、环保、唤鼍哂兴苄院谩⒁⒘具有抗肿瘤、抗菌、免疫激活及保湿吸湿等特点,使其在医药领域有着广泛的应用前景∞目前,由壳聚糖制备壳寡糖主要有两种水解方法:化学降解法酸解法兔附夥āK峤夥ā捎醚嗡峤到饪蔷厶牵淙皇屎蟃业化生产,但是生产方法缺点极多:比如由于反应产物单糖较多,而壳寡糖含量低,耗用大量盐酸、反应条件苛刻,工艺烦琐,后处理麻烦,同时这一:阂沼捎诓罅糠掀嵋海赘肪吃斐晌廴尽C附夥ň籰是指采用酶制剂在较温和的条件下降解壳聚糖。一般分为两类:非专一性水解酶【亢妥ㄒ恍运饷亲ㄒ恍悦腹て瘢抢萌缰久浮纤维素酶,溶菌酶等壳聚糖非专一性水解酶,降解壳聚糖。此法优点在可以迅速降低壳聚糖溶液粘度,且所需酶较为便宜,生产成本低,适合工业化,目前已经出现使用几种非特异性混合酶联合降解壳聚精的工艺,取得了较好的结果,这也是目前工业上酶法制各寡糖最常用日几丁质是产量仅次于纤维素的第二大类多糖。,由于具有无毒、可被生物医药卫生、农业等方面得到广泛的应用。而壳聚糖的降解产物壳寡耱嚣四川大学砸士学位论文
量使用大。专一性水解酶是利用以壳聚糖为专一性底物的壳聚糖酶,专一性水解壳聚糖,该反应条件温和,可通过反应时间控制水解产物,为大规模生产壳寡糖提供了可能,是一种较为理想的壳寡糖制备方法年,曲谘芯肯妇驼婢讨校紫忍岢隹蔷厶敲,.是一种不同于几丁质酶的新酶,这种酶对胶态几丁质不水解,但是能够降解完全脱乙酰化的壳聚糖,所以它被认为是会议上,几丁质酶被系统命名,在年壳聚糖酶也被系统命名。壳聚糖酶对壳聚糖有着较强的底物特异性,能快速高效的降解壳聚糖,通过控制反应条件,能够得到一定聚合度的寡聚糖。壳聚糖酶对壳聚糖的降解方式可分为内切酶和外切酶两种。内切酶降解壳聚糖生成壳二糖、壳三糖等寡聚体的混合物,而壳聚糖外切酶能水解壳聚糖生成氨基葡萄糖。由于内切酶的作用能产生不同聚合度的寡聚糖,因而更加中从细菌和放线菌中发现的壳聚糖酶大都属于号族,而真菌源的壳聚糖酶则属于号族,两族之间没有同源性。目前,人们已经从细菌、真菌、放线菌中、病毒以及植物中发现或分离纯化出了壳聚耱酶,而且运用基因