文档介绍：西安建筑科技大学硕士论文
城市生活污水中志贺氏菌的定量 PCR 检测研究
专业:市政工程
研究生:孙婷婷
指导教师:王晓昌教授
摘要
水污染是我国环境面临的严重问题之一,为了缓解由此造成的压力,我国水
污染治理工作力度日益加大,水质得到一定改善,但是污水经过处理工艺后仍然
有大量的病原微生物,其中有大量的致病菌,严重危害人类健康。志贺氏菌是典
型致病菌之一,它通过侵袭人类肠上皮细胞,造成患者腹泻、痉挛性腹痛、发烧
等症状,严重危害人类健康。鉴于此,在城市污水处理系统中对这种病原菌进行
检测以了解它的存在情况,对于以后改善污水处理工艺去除病原菌的效果以及评
价病原菌带来的风险等都具有实际指导意义。
本研究选用膜吸附-洗脱法对城市生活污水水样进行样前处理,通过选用一
对特异性均较强的引物 ipaH8 和 ipaH10,对浓缩后的志贺氏菌进行 PCR 检测。通
过梯度 PCR 考察了退火温度对检测结果的影响,选择 57 ℃作为退火温度。在定性
检测方法的基础上建立了志贺氏菌的 ipaH 基因定量 PCR 检测方法。研究通过结合
西安当地生活污水中志贺氏菌的分布情况,解决了 ipaH 基因在志贺氏菌中多拷贝
的问题。此外,本研究通过模拟自然水体,利用建立的 ipaH 基因定量 PCR 方法研
究水体中志贺氏菌的变化规律。同时,利用该方法分别对西安地区 A、B 两个不同
污水厂的进水和二级出水水质进行了监测,并对志贺氏菌的分布情况进行了简单
分析。

关键词:ipaH 基因;志贺氏菌;定量 PCR;多拷贝
论文类型:应用基础研究
西安建筑科技大学硕士论文

The research of Quantitative PCR Detection of Shigella in
Municipal sewage

Speciality: Municipal engineering
Author:Sun Tingting
Supervisor: Prof. Wang Xiaochang
Abstract
Water pollution is one of the environment problem China facing seriously. In order
to ease water shortage, we do more and more work to control water pollution, and the
water quality of sewage after secondary treatment has been improved, but the absolute
number of bacteria in the sewage is still considerable, so it does harm to human health.
Shigella is one of the typical pathogenic bacteria, it invades human intestinal epithelium
cells, causing diarrhea, abdominal pain, fever, . and doing harm to human health. In
view of this, the detection of Shigella in urban wastewater reclamation and reuse,
through which the presence of it can be known, is practically significant to the
improvement of the sewage treatment process for removing pathogens and the
evaluation of the risks of pathogens.
This research selected membrane adsorption-elution as sample pre-treatment
method for sewage water sample. We detected the concentrated Shigella using the
selected primers ipaH8 and ipaH10. Through gradient PCR,we analyse the influence of
the annealing tempe