文档介绍::牦牛;卵母细胞;体外成熟;体外受精墒炫嘌褐刑砑邮柿柯雅菀对卵母细胞的成熟和受精后的发育有积极影响,芫菏褂肂汉透牧糡痵液受精对卵母细胞受精后的卵裂率、赴诮舛尘浩分式虾谩⒕嘶罾胃叩那榭鱿拢梢圆痪细。苯咏辛酱卫胄慕母牦牛卵巢觯占捎寐涯赶赴个,目的在于研究某些因紊对牦牛卵母细胞体外成熟、体外受精的影响,以建立适合牦牛体外成熟和体外受精的培养体系,并为将来进一步的研究奠定基础,结果如下:油涝壮』竦玫穆殉苍的牛理盐水中,经过小时的保存后,其卵泡卵母细胞仍然能在体外成熟并受精发育。笈B雅萋涯赶赴∈弊笥铱稍谔逋獬墒欤逋馐芫ê蠓⑾郑墒炫嘌褐最适宜的血清砑恿课猯ィ渎蚜崖屎细胞发育率与添加差异添加%~%均可提高卵母细胞受精后的卵裂率、赴婧细胞率,与不添加钜旒灾,以添加%最好,添加量%。体外受精。芫菏褂酶牧糡痵液时,⒂什钜旒灾。屎详笈B雅萋涯赶赴逋獬墒斓呐嘌何#籘./妓崆饽/酮酸钠蟾/硫酸链霉索/青霉素钠。W钍屎详笈L逋馐芫ǖ奶跫#築目Х纫蚴疞受精∈薄本研究对牦牛卵泡卵母细胞进行了体外成熟和体外受精的系统研究。采集健康成年/嗡啬伞
.矿..鬗籭,篢∥篩,.加;唬痭%甒ィ產%%%%.:琌~琲瓵,甌疭—琲甎瑃甌/築疞琣瓵瓵
·雌二醇胎牛血清/
前言随着哺乳动物胚胎工程技术的深入研究和商业性胚胎移植技术的迅猛发展,牛本研究是博士生导师崔燕教授主持的甘肃省中青年基金资助项目《白牦牛卵母细胞体外培养及发育》一筒┦可际τ嗨木沤淌谥鞒值母仕嗍大多数哺乳动物的卵巢在动物出生时有几万到几十万的原始卵母细胞,它们都有发育为成熟卵子的能力,但绝大多数在发育过程中发生调亡,因此在它们的一生中只能排出几十个成熟的卵子。卵巢上的卵泡可分为腔前卵泡和有腔卵泡,它们的数量远高于排卵前的优势卵泡的数量,利用际蹙湍苡行У睦寐殉采的这些有腔卵泡甚至腔前卵泡内的卵母细胞,不仅有利于充分挖掘优良母畜的繁殖潜力,加速良种家畜的繁殖和育种进程,为胚胎工程的其它研究如胚胎细胞移植、胚胎干细胞系的建立、基因转移、胚胎性别鉴定、胚胎嵌合等提供合适的研究材料,促进胚胎工厂化生产进程,而且有利于揭示雌、雄配子在成熟、获能过程中的形态、生理交化及受精机理与早期胚胎的发育本质,评定精予质量并建立适合于进行体外受精的优良精子库,为受精生物学、发育生物学及低温生物学等学科提供重要的理论依据。此夕眉际踉谡缺粑6锖涂7⒗谜湎《锏方面也具有重要的意义。牦牛是生活在青海、西藏、新疆、甘肃和高原环境的特有牛种。这些地区自然条件十分恶劣,为高寒、缺氧环境,海拔~米,枯草期和冰封期很长。生活于这些地区的牦牛是一种经过长期的自然选择和自身适应而形成的特殊牛种。但是由于牦牛性成熟较晚,为季节性发情动物,产犊间隔长。崔燕等研究了不同年龄牦牛卵巢的形态及卵泡系统,发现牦牛卵巢内卵泡库比黄牛、奶牛等其他牛种少的多,卵泡闭锁率也较高,从而造成牦牛繁殖率低下。近年采用人工授精技术选育,而人工授精的重点在于通过父本的作用进行选育,选育的速度仍较慢,优秀母牦牛没有得到充分利用。国内外在牦牛的胚胎移植方面几乎尚未开展有关工作。从而严重阻碍了牦牛品种改良和繁殖工作的进行,制约了牦牛养殖业的发展。胚胎移植等研究取得了长远的发展。采用胚胎移植技术可以较快地提高良种母牦牛的繁殖率,挖掘优秀母牦牛的繁殖潜能,缩短世代间隔,迅速扩大良种牦牛的群体。科技厅省攻关项目《白牦牛体外受精和胚胎工程相关技术的研究》的一部分。
然而,这些新技术的实施都需要有大量的具有发育潜力和受精能力的卵母细胞供体进行操作。因此,各种动物卵母细胞的体外培养及其成熟调控的机理成为近几十年生殖生物学领域研究的热点。琁褪芫烟逋馀嘌琁部赏吵莆E咛ヌ逋馍,,是指在体外实验室条件下通过模拟母畜生殖道内的环外培养发育为囊胚的过程。卵母细胞成熟在发育生物学及胚胎工程中,占有重要的位置。就合子而言,卵母细胞成分占据了合子%以上的责任。死精细胞质内注射和球型精子带下注射都成功地获得了后代,而卵母细胞必须是在成熟之后才可完成受精并维持其后的胚胎发育。在生产上,对卵母细胞体外成熟的研究,可以加速良种家畜的繁殖,挖掘优秀母畜的繁殖潜能,为遗传育种提供新的手段和方法。在理论上,对卵母细胞成熟的研究将有助于揭开“生命启动”之谜,为发育生物学提供理论依据。为此,本项目拟首先从牦牛卵母细胞的体夕墒旌吞逋受精方面着手研究,在此基础上建立一套完全在体外培养条件下快速生产大量优质廉价的牦牛胚