文档介绍：∥!坏┞畚拇鸨缛掌冢骸!灰敌巧坏┮学位论文馓。山羊卵母细胞冷冻保存及体外受精的研究周俊波学科专业名称:堂垫速鲎直盐量鳘堕指导教师姓名:至查蕉墼挂:堑型盘堂嬲地郏±学位授予单位:堑蜘盘茔学位投于日期:§生§旦答辩委员会主席:—盔』觟塞一至垫盐塾撞丝苤遗墼撞堑论文提交日期:申请学位级别:论文评阅人:年心
,:周俊波导师:王杏龙教授扬州大学动物科学与技术学院,江苏扬州,本文主要采用两种不同组合的冷冻液法玻璃化冷冻不同期、的山羊卵母细胞,并对冷冻后的卵母细胞进行体外受精实验。主要结果如下:昧街植煌楹系睦涠骋篤涠掣髌、山羊卵母细胞。经用涠骋豪涠澈螅珿诘男翁B省成熟率、%、%:培养蟮姆直鹞%、.ァ%;诘亩澈笮翁B饰%、>肰涠骋豪冻后期的形态正常率、成熟率、%、%;%、%;诘亩澈笮翁B饰%、#阶槔涠骋憾杂Ω髌诘亩澈笮翁B省⒊墒炻屎褪芫什钜炀幌灾蘼凼荲还是窖蚵涯赶赴贕凇和体外培养蟮穆涯赶赴亩澈蟪墒炻什钜觳幌灾;但期和体没衲芫雍臀椿衲芫樱猿墒炻涯赶赴邢晕⑹诰ê%,%撸ú钜觳幌灾。9嫣逋馐芫的受精率%认晕⑹,两者差异显著。说明技术相比较常规芄惶岣呗涯赶赴氖精率。关键词:山羊,卵母细胞,逋馐芫ǎ琁蛌和.
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赶赴睦涠卵母细胞的发育过程及生理特征闩吾平衡的维持者。它既为人类基本生存及实现可持续发展提供了丰富的生物资源,同时也在水土保持、气候调节、污染防治、生态旅游和科学研究方面起着重要作用。随着人口的急剧增长和经济的飞速发展,生物多样性正遭受到前所未有的破有一种动物灭绝。生物多样性的锐减,将急剧影响和谐的大自然,其结果势必威胁到人类本身的生存和发展。为了建设一个和谐的自然社会,因此,保护有限的生物资源和可持续地利用生物资源已成为当务之急。于是科学家们采取了各项保冻、卵母细胞冷冻等等,这些冷冻方法其中精液冷冻、胚胎冷冻已经成熟并且有的己经应用于实际生产过程中,而卵母细胞本身对非生理环境非常敏感,技术要求比较高,所以它的冷冻方法相对于精液冷冻、胚胎冷冻发展较迟缓,现有技术只是实验室阶段。所以寻求一种简单实用的卵母细胞的冷冻方法很有必要。实事上,卵母细胞的冷冻和胚胎冷冻一样即采取特殊的保护措施和降温程序使卵母细技术。利用这项技术建立雌性基因库可以对良种家畜和珍稀动物、濒危动物的雌突变体的丢失;可以减少因建立动物园所需的大量人力、物力和财力;并使得快速而廉价的国内外卵母细胞运输成为可能,从而对世界范围内的物种交流有重要初级卵母细胞。之后,初级卵母细胞的生长根据染色体的变化情况经过细线期、在大自然中,生物多样性是生命支持系统最重要的组成部分,是自然界生态坏。据联合国环境规划署的一份报告:目前世界上每分钟有一种植物灭绝,每天护措施·,其中冷冻生殖细胞就是一个很好的方案。比如动物的精液冷冻、胚胎冷胞在一下几乎停止代谢,然后再进行升温解冻使卵母细胞恢复代谢能力的一项性基因进行长期保存:可以防止由于疾病或其他原因造成的各种动物品系和稀有意义:同时卵母细胞的冷冻为胚胎移植、核移植等胚胎工程技术奠定了基础。雌性哺乳动物在胚胎期,卵原细胞停止增殖,进入第一次有丝分裂前期成为周俊波山羊卵母细胞冷冻保存及体外受精的研究
卵母细胞的冷冻保存研究进展偶线期、粗线期发育到双线期。在双线期的后期,染色体高度疏松,外包完整的,也叫静止期】。这样,第一次成熟分裂被中这些初级卵母细胞才有可能恢复减数分裂,在第一次成熟分裂末期卵母细胞染色体、纺锤体等细胞器已经形成。最后生发泡破裂卵母细胞低温冷冻保存的研究开始于世纪年代‘。年,第一次有了低温冷冻保存小鼠诼涯赶赴逋馐芫浦埠蟛械谋ǖ缆。小鼠是该研究核膜,称为核网期断。此时的细胞核称为生发泡珿,处于期的卵母细胞,染色体尚未形成,且被核膜包围,而期卵母细胞的超微结构⑷廾ā⑾吡体、内质网等丛谏ぶ校资芡饨缬跋靝T诖傩韵偌に鼗蚱渌蜃拥淖饔孟拢懦龅谝患澹晌R桓龀墒斓穆涯赶赴。扬州大学硕士学位沦文
卯母细胞冷冻保存的影响因素领域应用最多的实验动物,许多问题都是通过对小鼠的研究探明的。研究者对卵母细胞低温生物学基础的研究开展较早,涉及透明带对水和冷冻保护剂的通透性以及不同低温、不同冷冻保护剂和降温速率对卵母细胞存活率的影响等【低温冷冻保存程序对卵母细胞主要结构和功能单位的不利影响也是研究的主要内容【浚量研究结果表明卵母细胞对非生理环境非常敏感