实验五 从牛乳中分离酪蛋白.doc

文档介绍：实验五从牛乳中分离酪蛋白
 
一、目的要求
掌握从牛乳中分离酪蛋白的原理,学会操作方法。
 
二、实验原理
牛乳中含有多种蛋白质,它们有着不同的性质,在脱脂牛乳的蛋白质中酪蛋白约占80%,酪蛋白是一类含磷蛋白质的复杂混合物。利用等电点时溶解度最低的原理,(酪蛋白的等电点)时,酪蛋白就沉淀析出。再用乙醇和乙醚洗涤沉淀,除去脂类杂质,便可制得纯酪蛋白。
 
三、实验器材
恒温水浴、普通离心机、精密pH试纸或酸度计、布氏漏斗、抽滤瓶、表面皿、离心管(80 mL)、量筒、烧杯(100 mL)、玻棒、电子天平。
新鲜牛乳。
 
四、实验试剂
%乙醇

mol/L醋酸溶液
mol /L pH –醋酸钠缓冲液,配制方法如下:
先分别配制A 液和B 液:
A 液( mol / L 醋酸钠溶液) 称取分析纯醋酸钠(NaAc·3H2O) g溶于蒸馏水中,定容至1 000 mL。
B 液( mol / L 醋酸溶液) 称取分析纯冰醋酸(%) g溶于蒸馏水中,定容至1000 mL。
取A液885 mL和B液615 mL混合,即得pH 的醋酸-醋酸钠缓冲液1 500 mL。
 
五、操作步骤
mL鲜牛乳,置100 mL烧杯中,加热至40 ℃。在搅拌下慢慢加入预热至40 ℃、pH –醋酸钠缓冲溶液40 mL,用精密pH试纸或酸度计检查pH, mol / L醋酸溶液调至pH ,静置冷至室温。
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