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文档介绍

文档介绍:血凝血抑试验原理
1
血凝血抑试验的重要性
§ 是WHO对与动物流感检测的标准方法
1. 有效预防动物疫病的发生
2. 有效判断动物疫情发生的原因
3. 有效推动动物免疫程序的制定
2
血凝血抑试验定义及原理
§ 血凝试验(HA)定义:某些病毒或病毒的血凝素,能选择性的使某种
或几种动物的红细胞发生凝集,这种凝集红细胞的现象称为血凝
(Hemagglutination, HA),也称为直接血凝反应,利用这种特性设
计的试验称血凝试验(HA)
§ 血凝抑制试验(HI)定义:当病毒的悬液中先加入特异性抗体,且这种
抗体的量足以抑制病毒颗粒或其血凝素,则红细胞表面的受体就不能与
病毒颗粒或其血凝素直接接触。这时红细胞的凝集现象就被抑制,称为
红细胞凝集抑制(Hemagglutination Inhibition,HI)反应,也称为血
凝抑制反应,利用这种特性设计的试验称血抑试验(HI)。
§ 原理:特异性抗体与相应病毒结合,使病毒失去凝集红细胞的能力,从
而抑制血凝现象。
§ 目的:检测鸡群是否有病毒感染和监测鸡群的免疫状态。
3
血凝血抑试验定义及原理
§ 用于禽流感、新城疫等具有血凝性病毒的鉴定:根据抗原与相应抗体的
特异性中和反应原理,给未知病毒悬液中加入已知的抗禽流感病毒阳性
血清或已知的抗新城疫病毒阳性血清,相应病毒便丧失了其凝集红细胞
的能力。因此,可利用从发病的鸡、鸭、鹅体内分离的病毒做HA和HI
试验。病毒悬液能凝集红细胞,并且能被已知的抗血清(阳性血清)所
抑制,那么该病毒即是已知阳性血清相对应的病毒。
§ 解析:如用新城疫阳性血清完全抑制了未知病毒培养物的血凝性,那么,
这个未知病毒培养物就是新城疫病毒;如果病毒悬液虽然能凝集鸡红细
胞,但不能被鸡新城疫血清所抑制,说明不是鸡新城疫病毒,可能是其
他有血凝性的病毒。
4
血凝血抑试验具体步骤
1. PBS液配置(举例,各实验室可能方法不同):称取NaCl 24g,
Na2HPO4 ,KCl ,KH2PO4 ,加蒸馏水至3000ml,加
,121度高压灭菌15min,4摄氏度保存备用
2. 1%鸡红细胞液制备(举例,各实验室可能方法不同):
I.