文档介绍：专题3 植物组织培养技术
课题2:月季的花药培养
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一、基础知识
（一）被子植物的花粉发育
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思考：
？
？
减数分裂
有丝分裂
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小孢子母细胞（2n）
（ 四分体 ）时期（n）
单核（ 居中 ）期（n）
双核期
（生殖）细胞核（n）
（花粉管）细胞核 （n）
（生殖）细胞（n）
（ 营养）细胞（n）
（ 2 ）个精子(n)
（核）分裂
（ 减数 ）分裂
单核（靠边 ）期（n）
（ 有丝 ）分裂
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（二）产生花粉植株的两种途径
快速阅读P38页有哪两种途径？原因是什么？
花药
胚状体
愈伤组织
丛芽
生根
植株
a
b
c
d
e
1．形成原因：主要取决于培养基中 种类及其浓度配比。
2．植株的特点： 植株，植株弱小， 。
激素
单倍体
高度不育
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？
思 考
，高度不育，是否就没有利用价值？
用于单倍体育种技术，可明显缩短育种周期，培育纯合新品种。
胚状体就像种子，有胚芽、胚轴、胚根等结构。胚状体到丛芽就是由原始的分化状态继续生长和分化完成的。
而愈伤组织形成丛芽的过程是从脱分化状态进入再分化形成丛芽的过程。
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（三）影响花药培养的因素
，为什么？
？
？
阅读P38-39思考：
诱导花粉植株能否成功及成功率的高低，主要影响因素是 和 。
培养基的组成
材料的选择
花期为初花期，花粉发育在单核靠边期，成功率最高。
选择完全未开放的花蕾
亲本植株的生长条件、材料的预处理及接种密度等。
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（一）材料的选取: 染色镜检
2. 针对不易着色的花粉细胞核，采用的方法是： 。花粉细胞核被染成 色。
。
机理：醋酸洋红为 性染色剂， 易被碱性染料着色染成红色。
二、实验操作
醋酸洋红法
焙花青-铬矾法
蓝黑
碱
染色体
碱性染料不是通常所说的酸碱性，而指染料中着色基团是阴离子/阳离子，若为阳离子则为碱性染料。
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（二）材料的消毒
（无菌吸水纸）
吸干水分
（％***化***溶液）
2～4min
（无菌水）
冲洗
花蕾
（70％酒精）
大约30s
（无菌水）
清洗
1. 与菊花外植体的消毒相比较，有何不同？为什么？
在酒精消毒前，花药不需要预先用流水冲洗、洗衣粉洗涤和软刷刷洗。
因为月季花蕾外面有花萼、花瓣或颖片保护，通常处于无菌状态，所以只要将整个花蕾或幼穗消毒即可。
？
花瓣松动后，微生物就可能侵入到花药，给材料的消毒带来困难。
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（三）接种和培养
思考：1、为何不能损伤花药且要彻底去除花丝？
2、培养时需要注意哪些事