文档介绍：河北医科大学
硕士学位论文
脑胶质瘤中细胞增殖和凋亡相关基因IASPP、p53表达研究
姓名:景世元
申请学位级别:硕士
专业:外科学
指导教师:侯凯
20080301
:彳颍郘研究生签名京世无导师签名:毒¨赕菥摺河北医科大学学位论文使用授权及知识产权归属承诺研究生学位论文独创性声明以本学位论文在导师蛑傅夹∽的指导下,由本人独立完成。本学位论文研究所获的研究成果,其知识产权归河北医科大学所有。河北医科大学有权对本学位论文进行交流、公开和使用。凡发表与学位论文主要内容相关的论文,第一署名单位为河北医科大学,试验材料、原始数据、申报的专利等知识产权均归河北医科大学所有。否则,本论文是在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果,除了文中特别加以标注和致谢等内容外,文中不包含其他人已经发表或撰写的研究成果,指导教师对此进行了审定。本论文由本人独立撰写,承担相应的法律责任。文责自负。
脑胶质瘤中细胞增殖和凋亡相关基因表达研究摘要目的:神经胶质瘤是来源于神经上皮的肿瘤,是颅内最常见的肿瘤。国内、外有资料表明,胶质瘤在所有颅内肿瘤中所占的比例约为..ァV琢鱿赴尴拗的增殖是肿瘤的主要特性,肿瘤的恶性程度越高,肿瘤细胞的增殖就越快,粗坪拖赴至训拇砦缶驮蕉啵兴鹕的南赴蛲鲆苍龆唷O匀唬龆ㄖ琢鼍辉龀さ氖窃鲋和凋亡这两个因素。侵匾5囊职┗蛑唬琾芋癌基因位于人类号染色体短臂上,编码一个分子量为的核内磷蛋白。由于其表达及半衰期特性,免疫组化方法通常检测不到野生鞍祝杉觳獾酵槐湫蚿蛋白。鞍籽粜表达结果与突变上具有相同含义。新发现的家族是能特异性地调节职┕能的蛋白质。家族的作用主要是通过特异性地影騪的细胞凋亡功能来实现的。细胞在受到基因损伤的时候,基因的表达会大量增加,产生鞍字省蛋白能与结合而起着转录调节因子的作用,该蛋白质可以停滞细胞复制来争取修复氖奔洌换蛘吒纱嗖恍薷炊苯尤盟鹕讼胞死亡,因此可以抑制不正常细胞增生,即可以抑制癌细胞的增生。但峭ü裁椿疲绾卫淳龆ㄏ赴且MV复制或者是进入凋亡程序,这个问题多年来一直是科学家努力想要弄清的问题。家族的发现则比较圆满的解释了中文摘要
限公司,工作浓度为稀释;兔抗人タ寺】固骞鹤胞和组织的抗原用磷酸盐缓冲液侨绾尉龆ㄏ赴阋M#焊粗苹蛘呤墙氲蛲龀绦虻摹存在时,就会首先与岷希餻与启动子的亲和性发生改变,,从而使基因受损细胞发生程序性死亡。与琻赫雙的结合位点,从而影駻本研究采用免疫组化方法检测。增殖细胞核抗原胞凋亡,探讨二者与肿瘤恶性程度的关系,以及二者之间的关系;通过免疫组化方法检在凋亡中的意义,方法:例胶质瘤切蜗赴标本,经%福尔马林固定,石蜡包埋,连续切片厚。按低持琢龇掷啾一抗:兔抗人嗫寺】固骞鹤员本┎┌律锛际跤抗体购自北京中杉金桥有限公司:凋亡试剂盒购自公司,生物素化山羊抗兔约梁屑芭ㄋ跣投被1桨珼鹤晕浜翰┦康鹿尽免疫组织化学:采用—捎蒙锼乇昙堑牡诙固逵肓疵顾乜生物素蛋白连接的过氧化物酶及基质色素混合液来测定细在缺乏,顷向于与停滞基因的启动子结合;而在亡抑制蛋白可恼=岷希鸬揭智鄏的诱导细胞凋亡能力的作用。琍,用ḿ觳庀以及二者之间的关系。准分为:例,级例,秎琁公司,工作浓度为∈停菏罂谷薖タ寺中文摘要
及同等稀释度的正常兔血清替代一抗作空白对照与替代对照。具体步骤如下:①石蜡切片经常规脱蜡至水后,以状甲瓒夏谠葱怨趸锩虎诰⒉ㄐ薷纯原冷却至室温:③正常山羊血清于室温下孵育,甩去不洗:④滴加一抗梗孵育虎莸渭由素化的羊抗兔娣跤;⑥滴加三抗℃,每次;显色,苏木素衬染,脱水透明,中性树脂封片。检测:以为检测指标,常规进行免疫组化染色;以不タ苟没撼逡捍娴那衅R跣远哉铡细胞原位凋亡检测法觳夤贪凑帐笛楹兴明书进行,检测时设不加从σ旱那衅鲆跣远哉铡结果判断标准:凋亡细胞核和阳性肿瘤细胞核均呈棕黄色。在四百倍显微镜下进行观察,每个标本组织片随机观察六个视野。分别计算每一病例的阳性染色的肿瘤细胞与所测肿瘤细胞的比例,作为凋亡指数珹和增殖指数。鞍字饕6ㄎ挥谙赴耍棕黄色颗粒状。鞍锥ㄎ挥谙赴撕拖赴剩首鼗粕颗粒状,表达结果采用半定量法分析。阳性肿瘤细胞的百分比通过陡弑毒迪轮辽倭鍪右叭范ǎ匆韵个范围计分:郑ィ分:ァィ分:%~%:郑ァィ分:ァV琢鱿赴庖呷旧ǖ那慷劝慈缦录品郑分:浅黄色;郑褐械然粕ǎ分:深黄色。因为肿瘤染色不均一,按主要形式进行评分。阳性肿瘤细胞的百分比和染色强度相乘产生每个病例的加权分数。加权分数被定为阴性,其余病例被定为阳性且加权分数分为治中文摘要
统计分析:本文所有数据用软件包完成统计。所有数据用中位数和四分位数问距表示。采用非参数统计的秩和检验,等级相关。结果:①凋亡指数的