文档介绍：第四军医大学
博士学位论文
牙髓干细胞分离培养鉴定和体外诱导分化的研究
姓名:陆群
申请学位级别:博士
专业:口腔临床医学(口内)
指导教师:吴补领;韩骅
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牙髓干细胞分离培养ê体外诱导分化的研究中文摘要韩骅教授赵皿教授博士研究生陆群吴补领教授谒木酱笱Э谇灰窖г导颐浅晒Φ卮有∈笱浪枳橹信嘌竦醚浪韪上赴徊椒治师牙髓干细胞的研究是目前牙髓生物学领域一个崭新的课题,它对认识牙髓损伤修复机理、探索新的保存牙髓治疗技术具有重要的意义。本研究着眼于小鼠牙髓干细胞分离、培养、鉴定的实验研究,为研究牙髓干细胞体外定向诱导分化创建可靠的实验模型。并初步探讨信号在牙髓干细胞中的生物学功能。结果显示:牙髓干细胞有增殖快的特点,细胞呈集落状生长,集落形成率为./⒑舜蟮奶点,有较多的双核细胞,细胞间的界限不清。碱性磷酸酶染色阳性。细胞表型组化鉴定—狪、一染色阳性,而染色阴性。端粒酶第四军巨大胯騆士学删巴:文~
提示藕磐揪犊赡懿斡肓搜浪栌谙赴姆只分析藕磐揪蹲瓒虾笱浪韪上赴只谋浠R虼耍颐枪菇关键词:牙髓干细胞,分化,藕磐揪活性分析结果,牙髓干细胞与肿瘤细胞有着本质上的区别,为非永生性细胞,且端粒酶活性随着体外培养时间延长而降低。电镜观察牙髓干细胞间存在细胞连接,在一定程度上说明细胞间有着较复杂的信号通讯方式,并影响着牙髓干细胞的增殖与分化。本课题对获得的小鼠牙髓于细胞进行了体外诱导分化实验。用、、认赴蜃佣匝浪韪上赴逋庥盏天的表达,,提示成牙本质细胞的分化成熟是牙髓干细胞和前体细胞增生并沿着一定方向分阶段分化的结果。是终末分化的成牙本质细胞的特征蛋白,说明牙髓干细胞可在、细胞因子诱导作用下,有向成牙本质样细胞分化的趋势。同时观察到细胞间信号在牙髓干细胞中有表达,为研究藕哦匝浪韪上赴脑鲋车挠为了进一步研究藕磐揪对谘浪韪上赴只讨械淖用,我们拟利用揪豆丶B家蜃覴条件性基因剔除小鼠,了表达虻哪孀B疾《驹靥澹竦帽泶镉蠧的病毒上清,∈蟮难浪韪上赴峁允狙浪干细胞的藕磐揪蹲瓒虾螅赴脑鲋呈艿揭欢ǔ潭鹊囊种疲响奠定基础。,¨
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文献回顾一牙髓干细胞研究进展牙髓干细胞的定义及分类随着经济和社会发展,人类的科学技术也在不断发展。最近几年。人们对于细胞在体外进行改造和修饰从而治疗疾病的“干细胞生物工程”已蓬勃展开。一九九九年和二辏上赴芯勘幻拦犊蒲А杂志评为世界十大科学突破之一训。干细胞研究以及利用干细胞治疗疾病的细胞组织工程已经成为继人类基因大规模测序完成后生命科学中最活跃的研究领域之一。这项生命科学的前沿技术已经成为科技竞争的焦点。干细胞的研究目前尚处于基础研究探索阶段,存在某些技术方法难以解决的疑难问题,但是却有一定的科学理论和科学事实作为根据,预期能从中产生创造性的科学技术成果。如人类已利用骨髓移植成功拯救无数血液病患者‘】。目前干细胞分类是根据不同的来源阶段和分化潜能分为全能干细胞、多能干细胞和专能干细胞。全能干细胞侵嘎涯赶赴刖酉赴融和为单个的受精卵细胞,受精卵无数次分裂产生植煌南赴形式组成整个个体。受精卵细胞最初三次分裂产生的鱿赴扛龆有能力产生发展成一个完整的人体。这样的细胞被称作全能于细胞第四军医大学栩吲宦畚·
牙髓干细胞的特点指一个子代细胞呛湍复上赴耆嗤南赴簿哂卸喾只。如果在这样阶段分裂的细胞会分离开,就产生一个完全相同的胚胎,双胞胎就是这种情况。多能于细胞单细胞继续分裂,大量干细胞增加,但每个干细胞所能生成不同类型的细胞数目是一定的,受到严格调控。旌蟊怀莆Lヅ中空的细胞球形成。胎泡细胞外层形成胎盘而内部大约个干细胞群形成发育胚胎的各种组织。这些是多能干细胞簿褪侨嗣浅L岬降腅它们能衍生制造出人体绝大多数不同形式的胚胎细胞,但是它们不能制造个体发育所需的所有细胞,如生殖细胞。专能干细胞又称组织干细胞,是一种或几种组织的起源细胞,在成人的组织中含量极少但却发挥重要功能,如皮肤干细胞,神经干细胞,造血干细胞,胰岛干细胞,牙髓干细胞等。组织干细胞可发育分化形成各种各样类型的细胞,其形成过程中受到严格限制。通常维持相对静息状态,只在机体需要如组织损伤修复时开始快速增殖自我更牙髓干细胞为组织干细胞,等于年第一次报道从人的第三磨牙牙髓组织中体外培养,获得集落状生长的、体外可诱导分化形成成牙本质样结构的牙髓干细胞,从而进一步加深我们对牙髓组织具有再生修复能力概念”组织特异性的干细胞的两个特点是自我复制和定向分化潜能锤上赴哂胁欢猿品至训奶氐悖庖彩遣煌淖橹上赴共性。以牙髓千细胞为例,不对称分裂即狝的