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文档介绍：petin 感受态细胞制备及转化
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产品描述
petin 感受态细胞制备试剂盒是一种快速、高效制备化学态感受态细胞的试剂
盒,用此试剂盒制备感受态细胞仅需简单的几个步骤,比常规的氯化钙方法更为快速
和高效。由 petin 溶液制备的感受态细胞可用于即时转化也可长期冷冻保存。
使用 pUC19 质粒进行检测,转化效率可达到 108 cfu/μg DNA。petin 感受态细
胞制备试剂盒提供了快速而方便的制备方法,适用于几乎所有常用的大肠杆菌菌株。

试剂盒组成
GB Transformation Kit
产品保存条件
100 ml SOB 培养基室温
50 ml GB-Wash Buffer 4℃
20 ml petin Buffer 4℃
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GB Transformation Buffer Set
产品保存条件
100 ml Wash Buffer 4℃
40 petent Buffer 4℃
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订购信息
产品编号规格
GB Transformation Kit GB4001-10 1 kit
GB Transformation Buffer Set GB4002-10 1 kit
单独产品的订购
SOB 培养基 GB4001-01
GB_Wash Buffer GB4001-02 100 ml
GB4001-03 200 ml
petin Buffer GB4001-04 25 ml
GB4001-05 50 ml

保存
制备感受态细胞所用试剂可在 4 0C 保存半年。
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使用说明
A. 感受态细胞的制备
1. 用接种针挑取大肠杆菌(-80 °C 甘油保存菌),在 LB 平板培养基上划线,置于
37 °C 恒温培养箱中过夜培养至长出单独菌落。
2. 挑取 10-12 个饱满的单菌落至 5 ml SOC 培养基中,置于 37 °C 摇床中过夜培
养。
3. 在上述过夜培养的菌液中加入甘油使其浓度达到 15%,将上述细胞分装于 ml
离心管中,每管 1 ml,分装后保存于-80 °C 作为种子菌。
4. 在 100 ml SOB 培养液锥形瓶中加入 1 ml 种子菌,置于 37 °C 摇床培养至 OD600
达到 -。
此步骤大约需要 3 小时的培养。
确保 OD 值不要超过此范围,否则将不能保证转化效率。
5. 停止细胞培养,将其置于冰上 30 分钟并缓慢摇晃,使其可以快速预冷。然后于
4℃下 3,000g 离心 10 分钟。
6. 弃上清,加入 10 ml 预冷的 GB-Wash Buffer,轻轻混匀使细胞重悬浮。在冰上放
置 20 分钟。
平底的离心管将使离心后的细