文档介绍：南方医科大学
硕士学位论文
冻干同种异体骨材料对淋巴细胞转化的影响
姓名:李明东
申请学位级别:硕士
专业:骨外科学
指导教师:裴国献
20090508
冻干同种异体骨材料对淋巴细胞转化的影响硕士研究生:李明东指导教师:裴国献教授摘一、研究背景要长期以来,临床上的骨缺损修复,特别是大段骨缺损的修复,一直是外科医生面临的难题之一。用于骨缺损修复的材料主要有自体骨、同种异体骨及人工骨三类,其中自体骨,具有骨生成能力强、无免疫排斥反应,容易愈合的特点,但在骨缺损的治疗过程中,自体骨移植也有明显的局限性和并发症【浚热缋丛从限、二次伤害、增加感染机会等,这些原因限制了其在临床上的应用;人工骨虽然传导性较好但也有诱导性差【、缺乏孔隙、颗粒较小、易分解、脆性大不耐压及相对缺乏生物活性等缺点,也限制了它的应用。而同种异体骨自年】做了人类历史上首例同种异体骨移植术,年最早实施了膝关节肿瘤切除后的同种异体骨移植术,年媪恕豆且浦餐饪啤芬岳矗同种异体骨移植逐渐成为骨科治疗的重要手段,它取材方便,数量形状不受限制,对已被破坏的骨折周围的内环境,有着恢复迅速、改善和重建血循环快捷并且其成骨性能及力学性能优于人工骨,而来源也不像自体骨那样受到限制等,诸多独特的优势和应用价值,进而使得同种异体骨在临床上应用广泛·悄壳肮科最常用的骨植入材料【,但也存在一些目前难以彻底解决的问题。如免疫排斥、晚期感染、移植骨愈合缓慢等,同种异体骨移植愈合受它的生物机制和免疫机制两大原则支配,而免疫排斥反应是它的关键;免疫排斥反应的主要表现为异体骨周围炎症细胞浸润,再生血管变性闭塞,造成骨诱导和骨传导作用下降及广硕士学位论文
疾病传播与免疫排斥反应■而移植排斥反应仍是导致新鲜同种异体骨移植失败的最主要原副引。机体的免疫系统对于植入体内的非己成分忠焯骞会产泛的骨吸收,引起骨延迟愈合、不愈合、骨质疏松、骨折等;异体骨是异体生物性材料,具有一定的免疫抗原性,免疫排斥反应是制约异体骨移植的主要因素。降低异体骨移植的免疫排斥反应是提高治疗效果和决定异体植骨成功与否的关键;所以排斥反应仍是目前一个大课题,随着对材料生物相容性研究工作的不断深入,以及材料和器械在临床应用中所出现的一些问题,人们逐渐地认识到人体免疫系统与生物材料之间相互作用的重要性。早期异体骨移植的最大问题是生一系列免疫应答的防御行为,其中包括炎症反应、抗体产生、补体活化及各种细胞因子的表达等,因此在生物材料和医疗器械的生物学评价中引入免疫学评价的内容将对减小人体应用的风险提供必要的科学依据,同种异体骨是骨科最常用的骨植入材料之一【浚币焯骞堑拿庖咴杂胍焯骞且浦残薷垂侨彼鸬临床效果密切相关⋯。目前,关于医疗器械产品免疫毒性实验研究的选择可参照.,但价中的免疫毒理试验标准也未正式发布,选择试验只能参考国外的试验项目进行【庑┦悄壳肮侵踩氩牧厦庖叨拘云兰鬯媪俚哪烟猓虼搜扒蟛⒔⒖焖佟准确、灵敏、有效的适合生物材料和医疗器械免疫学评价的方法,则是目前亟待考虑解决的问题,目前关于其免疫原性的研究大多以临床疗效为依据,基础实验研究方面少有报道,且该类产品应用以来检测机构也未针对其制定出一个免疫原性检测的标准,本研究是在实验室的层面上对已上市冻干同种异体骨产品进行免疫原性的研究与评价,淋巴细胞转化实验作为测定机体免疫功能的重要实验,它可以反映机体的细胞免疫水平,本研究采用骨材料与人的淋巴细胞体外共同培养,通过检测淋巴细胞转化率的变化来说明冻干同种异体骨能否引起淋巴细胞的变化、是否存在一定的免疫原性作用,同时根据各组数据分析何种动物更适合免疫学实验研究,从而为该类产品免疫原性检测标准的建立提供一定的方法学参考。中文摘要迄今为止,国内外对于试验项目的选择以及试验方法尚无统一的规定,生物学评Ⅱ
统计软件处理,实验结果用池表示,均数比较采用方差分析,多个样本均数之间三、实验方法二、研究目的四、研究内容和过程在实验室层面上对已上市的同种异体骨材料的免疫原性进行研究,通过检测同种骨材料与淋巴细胞体外共培养时淋巴细胞转化率高低来说明骨材料能否引起淋巴细胞的变化、是否存在一定的免疫原性作用,免疫原性是否与剂量有一定的关系;比较各动物来源的淋巴细胞与人淋巴细胞转化试验结果的相关性,分析何种动物更适于免疫原性研究试验;摸索同种异体骨免疫原性评价的方法学,为同种骨材料免疫原性的检测标准的建立提供一定的方法学参考;为复合实验分为四部分:人淋巴细胞组、新西兰兔淋巴细胞组、∈罅馨拖赴组、/∈罅馨拖赴椋直鹩氩牧冻干同种异体骨粉才嘌觳饬馨细胞转化率戳馨拖赴;笛,每组各个样本,每种动物实验分组情阴性对照组:羟基磷灰石粉痬淋巴细胞实验材料组:楣欠/馨拖赴楣欠踠/,竺副暌双波长