文档介绍：西南农业大学
硕士学位论文
根癌农杆菌介导FPF1基因转化菊花的研究
姓名:皮伟
申请学位级别:硕士
专业:园林植物与观赏园艺
指导教师:李名扬
20040501
西南农业大学硕学位论文摘要
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根癌农杆菌介与基因转化菊花的研究
研究生皮伟
指教师李名扬教授
西南农业大笋园艺园林学院,重庆
摘要
据史料记载,早在三千年前,古埃乞和叙利亚就已开始栽培蔷薇和铃兰,我载最早的是昊王夫差曾在会稽营烈梧桐园,广植花木。现在,花卉产业已成为世界上最具活
力的产业之一。由于经济的发展和市场自刺激,花卉育种越来越受到植物育种工作者的重视,对新
品种、高品质花卉的要求促进了花卉育和作的不断发展。人们通过常规杂交育种、辐射育种、组
织培养育种、多倍体育种、航天育种等手受培育了大量的花卉新品种尤其是上个世纪年代以来,
随着分子生物学和基因工程技术的发展,利用转基因技术培育新品种成为育种工作者研究的热点。
将目的基因定向导入植物细胞或组织中,培育成植株,则可获得人们预期的新材料新品种,从
而为花卉的定向育种提供了一条更有效白新途径。目前己有数十种花卉植物获得了转基因植株。
菊花是我载最早见于《礼记》中,距今己有两千余
年的历史。菊花不仅为我国人民所喜爱,而且早己传至国外,现为世界各国”泛栽培。虽然全世界
菊花品种已有多个我国也多达多个,但绝大多数品种自然花期集中在月前后,仅少
数花型较小、花色单调的品种能在夏季或早秋开花。因此,丰富的菊花品种资源并未得到充分的利
用。菊花的花期问题在一定程度上制约菊花生产的发展。在菊花的育种工作中,国内外育种者多
集中在花色、花形及抗逆性等方面的研,而改变花期则土要通过人为光照处理的方式来解决。人
为光照处理不仅成本高,技术上要求严书而且并不是所有品种都适合这种处理。这也是至今切花
市场上菊花品种单一的原因之一。我国京农业大学的李鸿渐为了攻克菊花花期局限的难题,在
年开始利用常规杂交育种法进行切花菊新品种的选育工作,培育了上百个新品种。虽然花形、
花色各异,但并为从根本上解决花期的题。传统的杂交育种方法存在随意性大、杂交难度大、周
期太长、难以打破基因连锁等不足。
据研究,植物的开花期是由基因控制的,环境因子以及细胞自身的生长状况对这些基因的表达
起着调控作用。环境因子对植物开花时闰决定基因的调控是通过光周期和春化作用来实现的。有的
植物对日照长度非常敏感,必须经历时间的长日照或短日照才能开花,因而相应地分为长日照
植物和短日照植物有的植物必须经过一定时间的低温诱导才能开花,低对开花的促进作用被称
为春化作用还有的植物营养生长到阶段后,即使没有适宜的环境因子的诱导也会开花。菊花
是典刑的短日照植物,植株在营养生民一定阶段后,必需经历一段时间的短日照诱导,才能进行
西南农业人学硕士学位论文摘要
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花芽分化和开花。
从拟南芥和金鱼草中,人们利用突工体已经克隆到了一系列与开花时间有关的基因,如
等开花促进其因和、等开花抑制基因,并对这些基因
的结构、功能以及表达调控进行了深入石究,有的已经进入了应用研究阶段。如华志明通过控制
基因的超表达导致转基因烟草的花川明显提前杨树止常开花需要年,将拟南
芥基因转入杨树中,个月就刀花安利忻将基因转入矮牵牛,转基因植株表现出持
续不断开花的特性。
基因是年等人沙拟南芥文库中分离得到的序列长约的促进开
花基因,他们检测到该基因在光周期诱后很快在拟南芥顶端分生组织中表达。后来,等
将基因连上启动子再导入拟南芥中,使转基因植株的花期明显提前。黄琼华
将该基因转入油菜中,也获得了具有明早花、早熟性状的转化植株。
本研究旨在通过对菊花再生体系及杆菌介导的遗传转化体系的研究,将基因导入到菊
花中,以期获得花期提前的菊花新材料,井为利用转基因技术改良菊花品种的广泛运用打卜基础。
主要工作和结果如下
高频再生体系的研究
通过对个菊花品种幼叶再生的研叭,获得了“黄秀芳”以幼叶为外植体的高频再生体系,在
以叭的乡化培养基中再生率可高达。在培养基中添加
留可使再生芽出根快、整齐、根粗壮。
建立了以“黄秀芳”幼叶为受体的转化体系
通过对外植体的脱菌浓度、筛选浓度以及影响转化频率因素的研究,获得了根癌农杆
菌介导的“黄秀芳”幼叶转化体系叶翻在的根癌农杆菌菌液中浸染共培
养延迟筛选以留脱菌浓度,为叶盘分化抗性筛选浓度,
为生根抗性筛选浓度。