文档介绍：南方医科大学
硕士学位论文
富硒酵母对铜过量导致小鼠肝损伤保护作用的实验研究
姓名:李万立
申请学位级别:硕士
专业:营养与食品卫生学
指导教师:罗海吉
20090601
富硒酵母对铜过量导致小鼠肝损伤保护作用的实验研究摘要指导教师:罗海吉研究背景鉴于目前对于铜缺乏研究较多,但铜过量造成的危害以及如何防治等的实微量元素硒在人和动物体内的吸收、代谢、运转、分布等规律受肝脏制约,,同时使有毒的过氧化物还原成无害的羟基化合物,并使分解,因而可以保护细胞膜的结构及功能不受过氧化物的损害和干扰。因此,本铜作为机体一种重要的必需的微量元素,能维护骨骼、血管和皮肤正常的功能,促进骨骼、血管和皮肤胶原生成,参与机体的各种代谢。由它组成的酶类与多种疾病的发生、发展直接相关,其中包括糖尿病、冠心病、动脉粥样硬化、高血脂等。目前研究微量元素多数重视的是锌、铁、硒等,而铜经常是被忽略的。因此,了解人体铜的营养状况,以及进一步了解铜在机体健康和疾病中的作用显得非常必要。验报道研究很少。而且急性铜中毒或者铜过量的病例也很常见,如临床上的病味棺春吮湫是由于基因突变引起过量的铜沉积在肝内,最终导致肝功能受损的一系列的过程。文需要探导的是硒能否拮抗过量铜造成机体的损害。硕士学位论文
方法的目过量的铜对肝脏具有损伤作用,而微量元素硒作为一种有毒金属的拮抗剂,对于铜具有拮抗作用。以往有人用亚硒酸钠进行实验,但这种无机硒的毒副作用大。本实验选用富硒酵母作为拮抗剂来代替亚硒酸钠进行实验研究,是因为整个实验分为两个部分。试验一:康氖笛槟P实验动物为昆明小鼠,采用喂以普通全价颗物体内铜水平的高低、肝脏的病理损伤及其体内的脂质过氧化水平。具体造模次,第、,测定血清谷丙转氨酶和谷草转氨酶约把G搴透巫橹型浚⒆龈卧嗖±硪约暗缇导觳椤统计学分析实验结果以平均数±标准差弧纒硎荆τ肧软件进行单因素方差分析—嘀乇冉喜捎肔法,肝脏中铜和酵母是人类利用最广的微生物,其蛋白质含量高达%以上,还含有丰富的族维生素和多种矿物质,被称为优质营养之源,并且具有高度的富硒能力及将化学硒转化为生物硒的能力,大大消除了亚硒酸钠作为一种化学硒对生物体所产生的毒副反应和胃肠刺激。以往研究表明,它能够更高效、更安全地被生物体吸收利用。因此,富硒酵母可以适当的作为一种保健品添加到我们的同常食物当中,以此对患有此类疾病人群的肝脏起到一定的保护作用。基于上述观点,本实验通过建立小鼠铜过量的实验模型和富硒酵母拮抗铜过量的实验研究,以观察富硒酵母拮抗过量铜引起的肝损伤的效果及其保护作用的可能机制。粒饲料辅以定期定量灌胃不同剂量铜溶液,快速建立铜过量动物模型并观察动方法如下:只昆明小鼠平均分为椋组为对照组,每天用灌胃生理盐水/牧酸铜每日灌胃危芎螅鄄旄巫橹斜含量、超氧化物歧化摘要Ⅱ
结果:含量数据经检验方差不齐,以ń薪品讲罘治觯嘀乇冉喜捎铜含量数据经检验方差不齐,以ń薪品讲罘治觯嘀乇冉喜捎肤色:与对照组比较,铜过量模型组小鼠在实验第芸J汲鱿制っù植凇硕士学位论文法,衔2钜炀哂型臣蒲б庖濉试验二:卓构客Ч笛只昆明小鼠雌雄各半,平均体重K行∈笏婊殖组,每组唬珹组:、、槊刻炀·蛩嵬以铜计辔福魑J笛榇碜椋坏保怨辔阜绞椒直鸶鐱、组小鼠不同剂量的富硒酵母,即椋焊晃湍父呒亮椋焊晃湍钢屑亮孔/·,椋焊晃湍傅图亮孔·;樾∈笥敏燃谆宋为配制富硒酵母的溶剂辔福魑4矶照组。小鼠雌雄分养于塑料不锈钢笼内,室内温度妫杂山常去离子水。第卸锫樽砗蟠λ馈观察补硒对肝脏丙二醛俊⒊趸锲缁、⒔懈卧病理组织学检查和肝细胞凋亡检测,同时测定血清中谷丙转氨酶凸草转氨酶钚浴J笛榻峁云骄辣曜疾;±表示,,肝脏中试验一:第一部分:小鼠铜过量模型的建立。啃∈蟮囊话阕纯觯稀疏,毛色失去光泽,耳、脚爪、尾巴均出现明显的色泽苍白,牙齿呈黄褐色,/·,痵/
并随着实验的时间延长上述症状更加明显。行为改变:随着实验的进行,铜过量模型组小鼠生长缓慢,身体消瘦。表铜过量模型组小鼠的各脏器铜含量和血清铜浓度与对照组比较均有明显升肝脏肉眼可见光滑细润,色红,边缘锐利,光镜下染色可见细胞排列整齐,坏死,并可见炎症细胞浸润,在肝小叶问可见点状铜颗粒沉积。与正常对照组相比,、钚砸约把G濉⒏卧嗤死以及少量铜颗粒沉积;电镜提示肝细胞核、线粒体等细胞器异常,并可见铜现出倦怠,活动减少,反应迟钝,怕冷嗜睡蜷缩成团,易受惊吓,饮食明显减少。各脏器铜含量及血清铜浓度的比较: