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⑨硐撕训细于华中师范大学学位论文原创性声明和使用授权说明作者签名:匈哌暌自一日日期:伽、月乙日日期:砌,,年‘月≯,,年占月保密论文注释:本学位论文属于保密,在——年解密后适用本授权书。日期:蓿晔隆萑中的规定享受相关权益。回童途塞握变卮进厦┳坏┒坏┤恫本人郑重声明:所呈交的学位论文,是本人在导师指导下,独立进行研究工作所取得的研究成果。除文中已经标明引用的内容外,本论文不包含任何其他个人或集体已经发表或撰写过的研究成果。对本文的研究做出贡献的个人和集体,均已在文中以明确方式标明。本声明的法律结果由本人承担。作者签名:学位论文作者完全了解华中师范大学有关保留、使用学位论文的规定,即:研究生在校攻读学位期间论文工作的知识产权单位属华中师范大学。学校有权保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版,允许学位论文被查阅和借阅;学校可以公布学位论文的全部或部分内容,可以允许采用影印、缩印或其它复制手段保存、汇编学位论文。C艿难宦畚脑诮饷芎笞袷卮斯娑非保密论文注释:本学位论文不属于保密范围,适用本授权书。导师签名:日期:本人已经认真阅读“咝Q宦畚娜氖菘夥⒉颊鲁,同意将本人的学位论文提交“咝Q宦畚娜氖菘狻腥姆⒉迹⒖砂础罢鲁硕士学位论文/’
摘要兔出血症是由兔出血症病毒所致的一种急性、高致死性传染疾病,以全身实质器官水肿、出血性变化及淤血为主要特征。该病首先于年在我国爆发,随后迅速蔓延到世界各地,感染兔出血热病毒的兔子常在∈蹦谒亡。病毒粒子呈球形,无囊膜,。。其中为专一感染兔的痘病毒。该病毒属于痘病毒科,野兔痘病毒属,痘病毒含有能够被真核细胞识别的启动子,这些启动子不但可以启动基因工程中常用的一些标记基因的表达,而且还能够引发克隆的外源基因的表达。痘病毒经过改建后,可以发展成为表达外源基因的分子载体。本研究用兔粘液瘤病毒作为重组病毒载体,以粘液瘤病毒的非必须基因蛭M粗刈槲坏悖ü粗刈椋票改芡钡挚雇贸鲅H炔《竞驼液瘤病毒两种病毒的重组疫苗。这种重组疫苗表达兔出血热病毒的主要衣壳蛋白和筛选标记Mü秆”昙荊在荧光下筛选重组病毒,经过几轮空斑筛选,分离纯化重组病毒。与野生型病毒相比,虮磺枚狭说重组病毒在细胞中的复制并未受到影响。皮下注射重组病毒疫苗后,被注射兔子血清内产生了抗体,并且能抵御毒力最强的粘液瘤病毒毒株的攻击。关键词:兔出血热病毒;兔粘液瘤病毒;同源重组;疫苗.’‘
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⑨第二章材料与方法⋯⋯⋯ā目录摘;要⋯⋯⋯··⋯一一⋯”·一””⋯·一⋯⋯⋯⋯⋯⋯····”一⋯⋯⋯⋯⋯·⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯一、引言兔出血热病毒简介⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯“.贸鲅H炔《⒃诟鞯氐谋ⅰ.贸鲅V⒉≈⒉《綬姆掷啵蜃椋安《玖W印兔粘液瘤病毒介绍⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯·.谜骋毫霾《《镜姆掷嗉靶灾省以痘病毒为载体的重组病毒的研究⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯·非必需基因研究目的和意义⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯·实验仪器和设备⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯·实验材料⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯·.《!.⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯·.硬《疽褐刑崛〔《綝⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯·.蟪Ω司柿提取⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.蟪Ω司;基因的┰觥恋怼弧硕士学位论文Ⅱ⋯·‘●
⑨チ姿峄逋饬臃从Α琼脂糖凝胶电泳⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯纯化铩赴嘌跋喙夭僮鳌空斑实验测定病毒滴度⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯转染⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯”重组病毒的筛选⋯⋯⋯⋯⋯.重组病毒的纯化⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯重组病毒的扩大及鉴定⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯”舛ǹ固逍Ъ⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯第三章结果与分析重组质粒的构建⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯·.”昙堑闹刈橹柿!适宜毒力的载体病毒的选择⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.锸笛榧煅椴煌局暾骋毫霾《《镜