文档介绍：第三章???物理图谱的构建及序列测定物理图谱( ????????????) ????????????物理图?限制性图谱( ???????????????)是各种限制性内切酶切点在某一???分子或???片段上的排列,由于各酶切点之间的距离是以碱基对( ?????????)表示的,所以可计算出二切点间的绝对距离,因此限制图也称物理图。物理图谱的构建是基因组研究的重要组成部分。质粒??????的限制图一、限制性核酸内切酶( ????????????????????????) ?细菌核酸内切酶?识别、剪切特殊双链???序列?用途: ???物理图谱构建、???序列分析、基因分离、基因定位、???重组??细菌的?修饰作用和限制性核酸内切酶的发现???世纪??年代, ????????????、???????????????: ????噬菌体???细菌菌株?,正常生长。???????????????????细菌菌株?,生长受到强烈抑制;少数存???????????????????????活,再次感染菌株?,正常生长??受到???????????????????????宿主的特意修饰。机制? ??? ??????????? ?????????? ???????λ噬菌体感染率? 菌株???????, ?????:宿主的修饰在噬菌体???上进行?????, ?????:宿主对入侵噬菌体的修饰与噬菌体???降解密切相关;预言细菌中存在位点特异性限制酶;修饰是宿主***化酶作用结果:建立细菌限制?修饰( ???) 系统概念。?????假说?细菌中存在具有相同位点特异性的??种酶?: 限制性内切核酸酶;***化酶?细菌的限制?修饰系统是抵御外来侵袭的一种重要措施?????年诺贝尔生理学或医学奖限制性核酸内切酶的发现?????年, ????????????于大肠杆菌?中发现第一种限制性内切核酸酶( ?型:识别特异剪切随机)。?????年, ???????????????从大肠杆菌?中获得高纯度限制性内切核酸酶( ?型)。?????年, ?????从流感嗜血杆菌??中分离出第一种??型限制性内切核酸酶?????????。?流感嗜血杆菌?( Haemophilus influenzae )能迅速降解外源的噬菌体?????,其细胞提取液可降解? ????,但不能降解自身?????,?? Hin ?Ⅱ?限制性内切酶。? Hin ?Ⅱ?限制性内切酶位点和切割位点如下: ??????????????????????????????????????????????????????????????????????