文档介绍：质粒DNA制备
一、质粒简介
质粒是细菌内独立于染色体并能自我复制的小环状DNA分子
其大小范围从lkb至200kb以上不等。
已经在形形色色的细菌类群中发现质粒.
这些质粒都是独立于细菌染色体之外进行复制和遗传的辅助性遗传单位。
质粒通过细菌间的接合作用,从雄性体转移到雌性体,是细菌有性繁殖的性因子.
1946年, Lederburg和Fatum发现的F因子是最早发现的质粒,F因子与高等生物细胞质中的染色体外遗传单位极为相似。
1952年,由Lederburg正式命名为质粒。
确切地说,质粒是细菌内的共生型遗传因子,它能在细菌中垂直遗传并且赋予宿主细胞表型,是比病毒更简单的原始生命。
质粒依赖于宿主编码的酶和蛋白质来进行复制和转录。通常,质粒含有编码某些酶的基因,这些酶事实上在一定的环境下对细菌宿主有利。
由质粒产生的表型包括对抗生素的抗性、产抗生素、降解复杂有机化合物,以及产生大肠杆菌素、肠毒素及限制酶与修饰酶等等。
质粒是携带外源基因进入细菌中扩增或表达的重要媒介物,这种基因运载工具在基因工程中具有极广泛的应用价值,而质粒的分离与提取则是最常用、最基本的实验技术.
二、质粒特性
1. 分子相对小
在5kb左右,质粒较小,比较稳定,不易受物理因素的损伤,此外,较小的质粒一般有较高的拷贝数。
2. 含有高效的自主复制成分
质粒的复制与宿主细胞的繁殖不相关,在抑制细菌蛋白质合成时,细菌染色体DNA停止复制,但这种质粒可继续利用细菌原有的酶系进行复制
质粒含有复制起始点,此起始点及顺式作用调控元件组成一个复制子(replicon),能利用细菌染色体DNA复制所用的同一套酶系统,在细菌细胞中独立地进行自我复制及转录。