文档介绍：动物克隆研究现状及其展望
一、国内外研究现状
(一)概述
动物胚胎工程是当今生物工程的研究热点之一,目前主要向两头延伸:
胚胎工程
推广应用高深研究
(胚移产业化) ( 克隆、转基因)
分子克隆:人工扩增生物大分子 克隆(Clone) 细胞克隆:细胞系 (无性繁殖) 胚胎细胞克隆 个体克隆(卵核移植) 体细胞克隆
克隆源于希腊文,原意为树木的枝条,在生物学中系指一个细胞或个体以无性繁殖的方式产生一群细胞或一群个体,在不发生突变的情况下,具有完全相同的遗传性状,常称为无性繁殖系。
细胞核移植技术:将供体细胞核移入除去核的卵母细胞中,使后者不经过精子穿透等有性过程即无性繁殖就可被激活、分裂并发育成新的个体、使得核供体的基因得到完全复制。
(二)哺乳动物胚细胞核移植
胚胎细胞克隆重大进展
技术基本成熟:如1枚牛胚获得了7头活牛犊。
继代克隆:牛连续克隆至第7代,获得了第3代犊牛,1枚胚连续克隆获得了190枚胚胎;山羊继代克隆5代共获得了45只不同代的后代,1枚胚连续克隆获得了298枚胚胎。
(类)胚胎干细胞系的建立:仅在小鼠上建立了 ES系(Evans & Kaufman,1981; Martin,1981),意义很大,可用ES细胞进行核移植。1995年,英国学者Campbell等,,曾被评为96年世界十大科技新闻之一。1999年,小鼠ES细胞克隆获得成功(Wakayama et al.,1999),用长期培养的牛PGCs克隆后获得了一头公牛(Mueller et al.,1999)。
(三)体细胞克隆进展
成年体细胞:
绵羊Dolly,乳腺上皮细胞,Wilmut et al. (1997);
小鼠30余只,卵丘细胞,Wakayama et al.(1998);
牛,卵丘细胞(5),输卵管上皮(3),Kato et al.(1998);老牛颗粒细胞(2),传代冻解,Wells et al.(1998);乳腺上皮原代细胞(1)与耳皮肤成纤维细胞(1),Zakhart-chenko et al.(1999);肌肉细胞(4),传4代,Shiga et al.(1999);耳皮肤成纤维细胞培养3个月传15代,Kubota et al.(2000);
山羊,张涌等(2000);成勇等(2000); Keefer et al.(2000)。
猪,颗粒细胞核移植胚二次核移植,Polejaevea et al.(2000)。
胎儿成纤维细胞:
绵羊,3只,Wilmut et al.(1997);6只, Schnieke et al.(1997);
牛,Cibelli et al.(1997);;Butler(1998); Zakhartchenko et al.(1999); Vignon et al.(1999);
山羊,Baguisi et al.(1999);
猪,Onishi et al.(2000)。
(四)哺乳类异种动物克隆研究进展
指核供体细胞与核受体细胞来源于两个不同的种系。
研究报导不多。
尚未见有异种克隆个体产生的报导,但有一些获得异种克隆囊胚甚至胎儿的报导。
大熊猫成年体细胞与去核兔卵母细胞重建得到了异种体细胞克隆囊胚(陈大元等,1999)。