文档介绍：主要步骤如下：
(1)取50mg左右的经无水乙醇浸泡过的肌肉样品，用灭菌的牙签挑成细丝状，
自然晾干。，加入500 p I DNA裂解液，加入5ml 20mg/ml蛋白
酶K振荡混匀。55T水浴保温2〜3小时，每隔10min摇匀一次。
(2)加入等体积的Tris饱和酚，摇匀，用封口膜封好，37C水浴2〜3小时。每隔
10min摇匀一次。
10, OOOrpm离心10min，小心转移上清液至一新离心管中，加入等体积的酚/*** 仿(1 : 1),摇匀 5〜10min。
10, OOOrpm离心10min，小心转移上清液至一新离心管中，加入等体积的***
仿‘摇匀5〜10min。
10, OOOrpm离心10min,转移上清液至一新离心管中，
，摇匀1〜2min。
(6)置于-20r冰箱中3小时。

试剂：70%乙醇，无水乙醇，1XTE ( )、1%琼脂糖。
(1)将221 (6)的总DNA溶液，10，OOOrpm离心10min，去上清液，留下沉淀。
用70%乙醇500 p I洗脱，剧烈摇匀，用手指弹击。重复此步骤一次。
10, OOOrpm离心10min,去上清液，留下沉淀，加入500 p I无水乙醇洗脱，剧烈摇匀，用手指弹击。
10, OOOrpm离心10min，去上清液，把离心管斜置于超净工作台中，自然晾
干。
(4)加入50 [3 I 1XTE溶解DNA沉淀，用手指弹击，室温放置30min，取3 口 I DNA 用1 %琼脂糖进行电泳检测。
(5)每个DNA样品分成两份，一份一20C保存备用，另一份4c保存进行下一步实验。
DNA的提取
总DNA的提取采用改进的高盐法。
1、取鱼背部肌肉约OQIg,，加入400ZSDS提取缓冲液和8 yLOmg/mL的蛋白酶K,混均，放在55C水浴锅中水浴 2 h或者37C过夜，中间震荡数次。
2、上清加入300 p的6M/L NaCI溶液，充分摇均，10, 000g/min离心30 min。
3、本文中加一步：上清移入新管加入等体积的***仿：异戊醇(24:1)混合液，摇均，
10, 000g/min 离心 10min。
4、上清移入新管加入等体积异丙醇，-20c下沉淀1 h以上，10, 000g/ min离心10 min。
5、弃去上清液，沉淀用70%的酒精冲洗两次，无水乙醇洗一次。
&室温下晾干，加入50 y LTE溶液溶解。-20C保存，备用。
总DNA电泳检测
取3 y LDNA样品和1 yL浪汾蓝buffer混合，用1 %的琼脂糖凝胶在75V电压下电泳30min, EB溶液染色15〜20min，电泳结果用凝胶成像