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生物化学蛋白质课件.ppt

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生物化学蛋白质课件.ppt

上传人:文库新人 2021/12/29 文件大小:3.52 MB

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生物化学蛋白质课件.ppt

文档介绍

文档介绍:关于生物化学蛋白质
第一页,本课件共有72页

各个解离基团的pK值与游离氨基酸的不完全相同。短肽的等电点和净电荷量可以根据pK值计算,蛋白质的等电点要用等电聚焦等方法测定。
第二页,本课件共有72页

(一)根据化学组成测定最低相对分子质量
假定某种微量成分只有一个,测出其百分含量后,可用比例式算出最低相对分子质量。
若测出两种微量成分的百分含量,分别用比例式算出的最低相对分子质量不相同时,可计算两个最低相对分子质量近似的最小公倍数。
第三页,本课件共有72页
例题:一种纯酶含亮氨酸(Mr 131)%,含异亮氨酸(Mr131)%,求最低相对分子质量。
解:按照Leu的百分含量计算,最低Mr X1:
X1=(100  131)/=
按照Ile的百分含量计算最低Mr X2:
X2=(100  131)/=
由于X1和X2数字差异较大,提示这种酶含Leu和Ile不止1个,为了估算Leu和Ile的个数,首先计算:
X1/ X2=≈
这种酶含任何氨基酸的个数均应是整数,说明该酶至少含有2个Leu,3个Ile,其最低相对分子质量为:
 2 = 或 ×3=
第四页,本课件共有72页
(二)渗透压法测定相对分子质量
第五页,本课件共有72页
(三 )沉降分析法测定相对分子质量
第六页,本课件共有72页
基本原理:
⒈ 离心力(centrifugal force,Fc):
当一个粒子(生物大分子或细胞器)在高速旋转下受到离心力作用时,此离心力“Fc”由下式定义:
F = m*a = m*ω2 r
a — 粒子旋转的加速度, m — 沉降粒子的有效质量,ω—粒子旋转的角速度, r—粒子的旋转半径( cm )。
第七页,本课件共有72页
⒉ 相对离心力(relative centrifugal force,RCF):
由于各种离心机转子的半径或者离心管至旋转轴中心的距离不同,离心力而受变化,因此在文献中常用“相对离心力”或“数字×g”表示离心力,只要RCF值不变,一个样品可以在不同的离心机上获得相同的结果。

第八页,本课件共有72页
G=×(10-5)×R×[rpm]2
离心半径为10厘米,转速为8000,其离心力为: G=*10-5*10*(8000)2=7104 即离心力为7104g.
而当离心力为8000g 时,其转速应为:8489即约为8500rpm
第九页,本课件共有72页
⒊ 沉降系数(sedimentation coefficient,s):
1924年Svedberg对沉降系数下的定义为颗粒在单位离心力场中移动的速度。
S:沉降系数,时常在10-13秒左右,故把沉降系数10-13秒称为一个Svedberg单位,简写S,量纲为秒。
例如,动物原生质核糖体的沉降系数等于80S,它的含义就是:80×10-13s。细胞及细胞的各组分的沉降系数有很大的差异,所以可以利用生物样品沉降系数的差异采用离心技术将他们彼此分开。
第十页,本课件共有72页