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保健功效及检测方法.docx

上传人:wenjiaosuoa 2022/3/15 文件大小:30 KB

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保健功效及检测方法.docx

文档介绍

文档介绍:一、多糖的检测方法
〔1〕粗多糖的苯酚-硫酸分光光度测定法
〔2〕葡聚糖的分光光度测定法
〔3〕硫酸软骨素的分光光度测定法二、皂昔类化合物的检测方法
〔1〕总皂昔的分光光度测定法
〔2〕绞股蓝皂昔的分光度测定法三、黄***及昔类化合物中2min,冷却至室温,用分光光度计在485nm波长处以试剂空白为参比,1cm比色皿测定
吸光度值。以葡萄糖质量为横坐标,吸光度值为纵坐标,绘制标准曲线。
样品测定:准确吸取上液适量〔V4〕〔含糖〕置于25mL比色管中,,然后按〔3〕法测定吸光度值。从标准曲线上查出葡萄糖含量,计算样品中粗多糖含量。
6、注释
〔1〕本方法线性范围在,线性方程为y=+,r=,假设工作需要标准曲线可延长至。
〔2〕本法测定样品中多糖时,提取时间以1小时为宜,以免因提取时间过长引起糖结构变化甚至使碳键断裂而导致所测多糖含量偏低。
〔3〕比色法测定多糖并非特异性反应,本法灵敏度高,出现测定结果平行性偏差较大,主要是操作不够严谨所致,反复几次的沉淀、洗涤、弃去上清液、样液的转移等都是造成测定结果偏差的原因。实际操作时每个样品要多做几个平行样,并尽量取用几个近似值的均值报告结果。由不同材料组成的保健品所形成乙醇沉淀物的结构也不同,用80%的乙醇洗涤沉淀物时〔如在15mL离心管中操作〕可先加少量〔〕在旋涡混合器或超声波振荡器中以增大撞击及分散沉淀物的强度,尽量将沉淀物打散,然后再加数毫升80%乙醇洗涤,对于一些粘黏包裹状的沉淀物,也可先加少量水溶解,然后再加80%的浓度洗涤,力求将附在沉淀物的杂质除去。
〔4〕关于乙醇的浓度:由于保健食品组方的复杂性,不同分子量得多糖所用的乙醇浓度沉淀效果是不同的,通常使用80%乙醇浓度不一定完全使用于所有的保健品中粗多糖测定,最好能在75%、80%、85%、90%、95%的乙醇浓度之间做预实验以优选最正确的乙醇浓度。
〔5〕关于酶解1〕淀粉酶的水解具有专一性,她只水解淀粉而不会水解其他多糖,在淀粉酶的作用下,使淀粉水解成低分子糊精和麦芽糖,再在糖化酶〔如葡萄糖昔酶〕的作用下变成葡萄糖。酶的用量应根据酶的活力而定。
2〕糖化酶是几种酶的简称〔学名a-1,4-葡萄糖水解酶〕,包括葡萄糖昔酶、淀粉葡萄糖昔酶
〔简称为葡萄糖昔酶〕、普鲁兰酶。药用辅料的淀粉一般都是直链淀粉,用a-淀粉酶+葡萄糖昔酶〔作用于直链淀粉,1,4糖昔键〕处理就可,如要作用于支链淀粉,需同时加入普鲁兰酶〔作用于1,6-糖昔键〕才能完全变为葡萄糖。
3〕酶的活性对酶解的效果影响较大
〔6〕多糖一复原糖换算系数之解释
〔7〕粗多糖测定最终报告结果要标示以葡萄糖计或葡聚糖计,因两者测定值相差很大。
〔第82页〕四、葡聚糖的分光光度测定法本方法适用于各类食品中以葡聚糖为主要结构、相对分子质量1*104以上的水溶性粗多糖的测定。
本方法的最低检出浓度为。
1、方法提要食品中相对分子质量大于1*104的高分子物质在80%乙醇溶液中沉淀,与水溶液中单糖和低聚糖别离,用碱性二价铜试剂选择性地从其他高分子物质中沉淀具有葡聚糖结构的多糖,用苯酚一硫酸反应以碳水化合物形式比色测定其含量,其显色强度与粗多糖中葡聚糖的含量成正比,以此计算食品中粗多糖的含量。
4、测定步骤
〔1〕样品处理1〕