文档介绍：盐酸萘乙二***分光光度法测定肉制品中的亚***盐
姓名: 班级:食品科学
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一目的要求
1 通过实验强化对紫外—可见分光光度法定量分析原理的理解;
2 了解以紫外—可见分光光度法为基础的检测方法的建立思路;
3 直观了解紫外—可见分光光度计的结构;
4 掌握紫外-可见吸收光谱的测定方法;
5 掌握利用标准曲线法进行定量分析的方法。
二实验原理
亚***盐在食品生产中用作发色剂和防腐剂,允许用于肉及肉制品的生产加工中,使得肉与肉制品呈现良好的色泽。其呈色机理是,亚***盐与肌肉中的乳酸作用产生亚***,而亚***不稳定易分解产生一氧化氮,然后一氧化氮与肌红蛋白结合产生红色的亚硝基肌红蛋白,使肉制品产生稳定的红色。但是过量的亚***盐能够引起高铁血红蛋白症, 导致组织缺氧,还可使血管扩张、血压降低。
在酸性条件下,亚***盐可与对氨基苯磺酸通过重氮化反应定量生成重氮盐,该重氮盐可进一步与盐酸萘乙二***通过偶联反应生成紫红色偶氮染料,在特定波长处产生较强吸收:
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通过测定该偶氮染料在特定波长下的吸光度,利用朗伯-比尔定律(A=KLc)可确定样品中亚***盐的质量浓度。
采用标准曲线法进行定量分析时,可对亚***盐标准溶液系列进行上述反应,通过测定该系列的吸光度,利用excel回归标准曲线,得到浓度和吸光度的关系,再将样品中亚***盐测得的吸光值带到方程中算出其中亚***盐的浓度。
三仪器与试剂
1 仪器
Cary Eclipse型紫外-可见分光光度计;BS 124S电子分析天平。
2 试剂
亚铁***化钾[)6·3H2O]、乙酸锌[Zn(CH3COO)2·2H2O]、硼砂[Na2B4O7·10H2O]、对氨基苯磺酸、盐酸萘乙二***,均为分析纯试剂。
四实验步骤
1 试剂配制
亚铁***化钾溶液: g 亚铁***化钾,溶解于水后稀释至1000mL。
乙酸锌溶液: g 乙酸锌,加30 mL冰乙酸溶于水,稀释至1000mL。
饱和硼砂溶液: g 硼砂,溶解于100 mL热水中,冷却后备用。
对氨基苯磺酸溶液: g 对氨基苯磺酸,溶解于100 mL 20%的盐酸中,置棕色瓶中摇匀,避光保存,其浓度为4 g/L。
盐酸萘乙二***溶液: g 盐酸萘乙二***,溶解于100 mL水中,,混匀后置棕色瓶中,避光保存,其浓度为2 g/L。
亚***钠标准储备溶液: g 已于硅胶干燥器中干燥24 h的亚***钠,用蒸馏水溶解移入500 mL容量瓶中,稀释至刻度,混匀。此溶液亚***钠含量为200 μg/mL。
亚***钠标准使用液:临用前吸取亚*** mL置于100 mL容量瓶中,加水稀释至刻度,此溶液亚*** μg/mL。
2 标准溶液系列和样品制备
标准溶液系列制备:吸取亚***钠标准使用液0、、5、10、15、20、25 mL于50 mL具塞比色管中,分别加入2 mL对氨基苯磺酸溶液,混匀后静置3~5 min,再分别加入1 mL盐酸萘乙二***溶液,加水至刻度,混匀静置15 min后测定,制成的标准溶液浓度系列为0、、1、2、3、4、5μg/mL。
样品制备: g 经绞碎混匀的样品,将其置于50mL烧杯中,