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上传人:朱老师 2022/5/3 文件大小:11.19 MB

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文档介绍:利用特异性S2
学位论文版权使用授权书
本学位论文作者及指导教师完全了解大连医科大学有关保存、使 用学位论文的规定,同意大连医科大学保存并向国家有关部门或机构 ,阳性率为25%。1 0例长春地区的标本 中PCR阳性为7例,阳性率为70%。毛霉、烟曲霉、念珠菌病石蜡切片 各l例的PCR扩增结果均阴性。
3.1 0例临床疑似孢子丝菌病患者的组织标本分别取自躯干(5例), 腕部(3例),面部(1例),眼睑(1例)。新鲜组织真菌培养9例阳性。 菌落3.1 0天长出。1 0例标本提取基因组DNA,应用引物S2.R2进行PCR 扩增所得结果9例阳性,与真菌培养的复合率为l 00%。
结论:
1.以感染孢子丝菌的小鼠模型为研究样本筛选孢子丝菌特异引物, 结果与在体外菌纯培养菌株筛选所得结果相同,针对几丁质合成酶基因 1的引物S2.R2为最特异、最敏感的引物。
2.与传统方法相比,改进的微波脱蜡、液氮研磨.CTAB破壁法可以 从存档的石蜡包埋组织中提取足量、高质量的孢子丝菌DNA。从而提高 了PCR反响的阳性率。
3.应用特异性S2.R2引物检测石蜡切片中的孢子丝菌阳性率可高达
91%。对培养阴性的标本也能检出,阳性率为25%。该方法不仅可利用 实验室保存的大量石蜡切片进行科研和临床回忆性诊断。同时也可作为 疑难病的诊断和鉴别诊断依据。
2
4.应用特异性S2.R2引物检测临床新鲜活检组织中的孢子丝菌,以 真菌培养为参照,阳性率可达l 00%。该方法具有操作简单,经济省时, 敏感特异性好,准确可靠等优点,适用于孢子丝菌病的快速诊断。
关键词:孢子丝菌 石蜡切片 活组织标本 S2.R2引物 小鼠
Use of specificness primer R2一S2 have accredit sporotrichosis of animal model paraffin section and clinical sample
Postgraduate:Wang—dong
Director:Prof.Liu—xiaoming
Speciality:Dermatology
Abstract
Sporothrix schenckii is the causative agent of sporotrichosis,which affects primarily the skin,subcutaneous tissue,lymph vessels,lymphnodes and rarely,visceral organs.Sporotrichosis spread widely in the world, Primary disease in our country northeast fairly pilosity,on prevail region batch to happen,harm persons heath.Now,this disease diagnose difficulty. Raising the fungus,waste lots of time(about one week),as well masccline
rate low;tissue pathology is nonspecific granulomatous inflammation,in telaetiology diagnosis still to remain restrict at HE and PAS dyeing,but because fungus are few,acquiring routine histology method is difficult.For the past few years,scholars have versatile explore on the this diseases’ investigation,including serology detection,IMFA,immunopathogenesis and electron microscopy.Because serology detection specific problem fail
to continue,although IMFA and immunopathogenesis raise dignosis’speed,
antibody standard is difficult.Electron microscopy man