文档介绍：1 高效液相色谱法测定热咳喘胶囊中黄芩苷的含量【关键词】热咳喘胶囊; ,, 高效液相色谱法; ,, 黄芩苷摘要:目的建立高效液相色谱法测定热咳喘胶囊中黄芩苷的含量。方法用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂;以甲醇∶水∶磷酸( 47∶ 53∶ ) 作为流动相; 检测波长 280 nm 。结果平均回收率为 %,RSD=% 。结论该检测方法简便准确,可用于该制剂中黄芩苷的测定。关键词:热咳喘胶囊; 高效液相色谱法; 黄芩苷热咳喘胶囊为我院自制制剂品种, 全方由黄芩、麻黄、天竺黄和地龙等 17 味中药组成,具有清热化痰、止咳平喘的作用, 用于热痰所致的咳嗽、咯痰、气喘等症; 以及急性支气管炎、慢性支气管炎急性发作见以上症候者。原标准未建立含量测定方法, 为增强制剂质量的可控性, 我们参照相关文献[1] ,用高效液相法测定黄芩中黄芩苷的含量,并对测定方法进行了方法学考察,取得了满意结果。 2 1 仪器与试药高效液相色谱仪: LC10ATvp 泵、 SPD10Avp 紫外检测器、 CTO10ASvp 柱温箱(日本岛津); Shimadzu Libror AEL 40SM( 十万分之一) 天平(日本岛津) ;甲醇(色谱纯,天津市大茂化学试剂厂);水( 重蒸馏, 临用前制备); 磷酸(分析纯,天津市大茂化学试剂厂) ;黄芩苷对照品(中检所, 批号: 1********** , 供含量测定用); 热咳喘胶囊样品(自制, 批号: 051101 , 051102 , 051103 )。其余试剂均为分析纯。 2 方法与结果 色谱条件色谱柱: Diamonsil C18(5 μ m,250 mm × mm ,迪马) ;流动相∶甲醇∶水∶磷酸( 47∶ 53∶ ) ;流速: 1 ml/min ;柱温: 30℃;检测波长: 280 nm 。理论板数按黄芩苷峰计应不低于 2500 。 对照品及供试品溶液的制备 对照品溶液制备精密称取在 60℃减压干燥4h的黄芩苷对照品适量,加甲醇制成每毫升含 45μg 的溶液,即得。 3 供试品溶液制备取供试品内容物约 1g ,精密称定,精密加入 70% 乙醇 100 ml ,称定重量,超声处理 30 min , 取出, 放冷,用 70% 乙醇溶液补足减失重量; 精密量取2 ml置 10 ml 量瓶中, 加甲醇至刻度, 摇匀, 用微孔滤膜( μm )滤过,取续滤液,即得。 阴性溶液制备取除黄芩以外的其他药材, 按制备工艺制成缺黄芩阴性样品。取黄芩阴性样品,按 项下方法制备,即得。 系统适用性试验分别取黄芩苷对照品溶液、供试品溶液及缺黄芩的阴性对照溶液各 10μl 注入液相色谱仪,记录色谱图。从色谱图可知, 在此色谱条件下, 样品有与对照品黄芩苷相同保留时间的对应峰, 并与其他组分峰达完全分离,阴性对照无干扰。 线性关系考察精密称取黄芩苷对照品适量, 加甲醇稀释制成 mg/ml 的黄芩苷对照品溶液,分别精密吸取黄芩苷对照品溶液 5, 10, 15, 25μl ,注入液相色谱仪, 测定峰面积积分值,测定结果见表 1 ,并以对照品进样量 X (μg )为横坐标,峰面积值 Y( )为纵坐标,绘制标准 4