文档介绍：关于免疫分析技术
第一张，共四十二张，创建于2022年，星期二
第一节 免疫检测技术概述
免疫检测技术起源：检测病原微生物抗原及抗体的血清学诊断。
1896年G. Widal和A. Sicard利用伤寒病人的血清与伤寒物稳定，不易解离，易于保存。
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（1）荧光免疫分析技术
直接法
优点：操作简便、特异性高、非特异 荧光染色因素少，
缺点：灵敏度偏低，每检查一种抗原需制备相应的特异荧光抗体
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（1）荧光免疫分析技术
间接法
优点：灵敏度高，在不同抗原的检测中只需应用一种荧光抗体。既可检测抗原，也可检测抗体。
应用：常用于微生物检测，例如：沙门氏菌。
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在医学检验中的应用:荧光抗体技术在临床检验上已广泛用于细菌、病毒和寄生虫的检验及自身免疫病的诊断等
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荧光显微镜
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（2）放射免疫分析技术
放射免疫分析技术（Radioimmunoassay，RIA）
定义：是以放射性核素为标记物的标记免疫分析方法，用于定量测定受检标本中抗原。
1959年，Yalow和Berson创建的分析方法。
基本原理：
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（2）放射免疫分析技术
常用标记核素：
125I： γ 射线，半衰期 60 天
3H： β 射线，半衰期 年
测量仪器
γ 计数仪
β 液闪仪
优点：
检测灵敏度高，高达ng~p***平;
测定的准确性好，数量级的回收率接近100%.
缺点：
操作相对复杂，
同位素半衰期短，保存及操作相对复杂。
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β液闪仪
γ计数器
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（3）酶联免疫分析技术
继免疫荧光抗体技术和放射免疫分析之后发展起来的一大新型的标记免疫技术，这一技术的诞生被誉为免疫血清学技术的一场革命，是应用最广泛的免疫学技术之一。
1971年，Engvall和Perlman首次报道建立酶联免疫吸附试验（Enzyme-Linked ImmunosorbentAssays, ELISA）。
由于ELISA具有快速、敏感、简便、易于标准化等优点，使其得到迅速的发展和广泛应用 。
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（3）酶联免疫分析技术
基本原理：利用酶催化底物反应的生物放大作用,提高特异性抗原-抗体免疫学反应的检测敏感性的一种标记免疫技术。
常用于标记抗体的酶：
酶须具有下列特性：有高度的活性和敏感性；在室温下稳定；反应产物易于显现；能商品化生产。
目前应用较多的有辣根过氧化物酶（HRP）、碱性磷酸酶、葡萄糖氧化酶等，其中以HRP应用最广。
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（3）酶联免疫分析技术
直接法测定抗体
缺点：每检查一种抗体需制备相应的特异抗体。
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（3）酶联免疫分析技术
间接法测定抗体
优点：灵敏度高，在不同抗体的检测中只需应用一种酶标抗体。既可检测抗原，也可检测抗体。
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（3）酶联免疫分析技术
双抗体夹心测定抗原
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（3）酶联免疫分析技术
应用：检测食品中农、兽药残留及微生物；还可以检测营养素，例如蛋白质、激素等。
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酶标仪
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（4）发光免疫分析技术
发光免疫分析：将发光分析和免疫反应相结合而建立起来的一种新的检测微量抗原或抗体的新型标记免疫分析技术。
发光:是指分子或原子中的电子吸收能量后，由基态（较低能级）跃迁到激发态（较高能级），然后再返回到基态，并释放光子的过程。
根据形成激发态分子的能量来源不同可分为:光照发光、生物发光、化学发光等。
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（4）发光免疫分析技术
化学发光免疫分析(chemiluminescence immunoassay,CLIA)：将具有高灵敏度的化学发光测定技术与高特异性的免疫反应相结合，用于各种抗原、半抗原、抗体、激素、酶、脂肪酸、维生素和药物