文档介绍：受控文件未经批准不得复印生效日期: 2013/03/20 第1 页,共 4页广州阳普医疗科技股份有限公司技术文件生物性能检验规程( 枯草芽胞杆菌- 无菌检验规范) 文件编号: QT – EF-02-003 版本: B/0 分发部门: 分发号: 拟制/日期 QC 微检员审核/日期 QC 经理 QA 经理批准/日期管理者代表技术文件生物性能检验规程( 枯草芽胞杆菌- 无菌检验规范) 文件编号 QT – EF-02-003 页次第2页,共4页版本/ 修改状态 B/0 受控文件未经批准不得复印生效日期: 2013/03/20 1目的对经环氧乙烷灭菌后的成品生物性能进行检测, 确认灭菌后产品是否能够达到无菌的要求。 2 适用范围适用于经环氧乙烷灭菌后的一次性使用静脉采血针、一次性使用微生物拭子( 不带培养基)、一次性保护套及适合枯草芽胞杆菌无菌检测的产品。 3职责相关无菌检查操作人员执行此规程。 4 工作内容 :枯草芽孢杆菌( 自含式菌片) .1 主要设备:通风橱、隔水式恒温培养箱、自动高压灭菌器。 .2 灭菌芽胞菌片的制备: 参照 GB18279-2000 , 按要求将一定数量的枯草芽孢杆菌( 自含式) 置于 EO 灭菌柜中一定的位置, 随产品一同灭菌即得。 .3 检验操作: 4 . 在通风橱下进行操作( 远离火源), 打开外包装袋。取一支包裹着三层 PE 袋的自含式菌片( 瓶装式, 瓶内含菌片及液体培养基), 去除包裹的第一、第二层 PE 袋后, 左手握紧瓶身, 右手用力按下瓶盖后,摇晃使培养基与菌片完全接触(出现内壁玻璃碎片)。 4 . 打开第三层 PE 袋,取出自含式菌片做好标识后并观察培养基与菌片是否完全接触(出现内壁玻璃碎片,培养基浸泡到菌片) ,放在试管架上。取下一支同上述步骤操作。 4 . 另取一片同批号未灭菌的枯草芽孢杆菌( 自含式) 同上述步骤操作,作为阳性对照。 4 . 将试管架上的菌片放入恒温培养箱 35℃培养 7 天, 培养期间应逐日观察并记录是否有菌生长。若出现异常时则每天上、下午各观察一次。 4 . 结果判定: 当供试品管液体均显绿色,阳性对照管液体显黄色, 即判定 EO 灭菌效果符合规定。当任一供试品管显黄色, 阳性对照管液体显黄色, 即判定 EO 灭菌效果不符合规定。当阳性对照管液体显绿色为实验无效。 :枯草芽胞杆菌(菌片) 4 . 主要设备: 超净工作台、隔水式恒温培养箱、自动高压灭菌器、电炉。 4 . 培养基: 胰蛋白胨大豆肉汤 4 . 培养基制备 4 . 将培养基按说明要求进行称量,以适量纯化水溶解,置于电炉上加热至沸直到培养基完全溶解。 4 . 分装待溶解后的培养基冷却后, 分装于试管中( 试管规格为 20-25mm 的管径)约 20ml , 然后塞紧试管。 4 . 灭菌将试管置于高压灭菌器中 121 ℃灭菌 20 分钟。使用前细菌培养基须经 30-35 ℃培养 48h , 证明无菌后, 制备好的培养基应保存在 2~ 25℃避光的环境, 有条件置冰箱 4℃~8℃冷藏储存较好。培养基若保存于非密闭的容器中, 应在三周内使用; 若保存于密闭技术文件生物性能检验规程( 枯草芽胞杆菌- 无菌检验规