文档介绍：: .

ICS ％。
甲醇：色谱纯。
乙酸乙酯。
正己烷。
氢氧化铵：25％～28％。
无水硫酸钠：经 300℃灼烧 4 小时，置于干燥器中备用。
流动相：甲醇：水（40：60）。
聚丙烯离心管：50 mL， mL。
比色管：50 mL，具塞。
梨形瓶：25 mL。
滤膜： μm，无机相。
***苯尼考标准储备液（1 mg/mL）：准确称取***苯尼考标准品 100 mg，用甲醇稀释至 100 mL，
摇匀，-18℃保存，有效期 90 天。
***苯尼考工作液（10 μg/mL）：准确移取（）中***苯尼考标准储备液 mL，用
甲醇稀释配制成 100 mL，摇匀，-4℃ 保存，有效期 30 天。
1DB34/T 1376—2022
***苯尼考标准溶液：取***苯尼考工作液（）适量，分别用流动相（）稀释为 0、20
ng/mL、50 ng/mL、100 ng/mL、200 ng/mL、400 ng/mL 的标准溶液，摇匀，4℃ 保存，有效期 7 天。
仪器和设备
高效液相色谱仪，配二极管阵列检测器或紫外检测器。
离心机，转速不低于 4000 r/min。
振荡器。
涡旋混合器。
分析天平：感量 g， g。
超声波清洗器。
组织匀浆机。
旋转蒸发仪。
测定步骤
试样提取
称取均质后的试样 5 g（ g），置于 50 mL 聚丙烯离心管中，依次加入 30 mL 乙
酸乙酯（）， mL 氢氧化铵（），5 g 无水硫酸钠，振荡提取 30 s，以 4000 r/min 离
心 5 min，上清液转移至 50 mL 比色管中，用乙酸乙酯定容至刻度，摇匀后取 10 mL 乙酸乙酯提取液到 25
mL 梨形瓶中，45℃ 水浴中旋转浓缩至干。
试样净化
梨形瓶中的残渣用 3 mL 水溶解，超声 5 min，加入 3 mL 正己烷（）涡旋混合 30 s，静置
分层，弃掉上层的正己烷，再加 3 mL 正己烷（）涡旋混合 30 s，静置分层，移取 1 mL 水相
于 mL 的聚丙烯离心管中，以 8000 r/min 离心 5 min，经 μm 滤膜过滤，供高效液相色谱
仪分析。
色谱测定
色谱柱：C18 （×250 mm，5 μm），或相当者。
柱温：40℃。
进样体积：20 μL。
流速： mL/min。
检测波长：365 nm。
流动相：甲醇-水（40：60）。
上机测定
取适量试样溶液和相应浓度的标准溶液，作单点或多点校准，以色谱峰面积积分值定量。标准溶液
及试样液中***苯尼考的相应值均在仪器检测的线性范围内，标准溶液高效液相色谱图见附录A中图
。
结果计算
按照下式计算试样中各种药物的含量：

2DB34/T 1376—2022
A×C ×V×1000
X = S ··············································