文档介绍：呼吸道感染IgM九项联检试剂盒(间接免疫荧光法)
说明书
【产品名称】
通用名称:呼吸道感染IgM九项联检试剂盒(间接免疫荧光法)
英文名称:PNEUMOSLIDE IgM
商品名称:PNEUMOSLIDE IgM
【包装规格】
10人份/盒
【预期用途】
采用间接免疫荧光法(IFA),同时检测人血清中呼吸道感染主要病原体的IgM抗体,可检的病原体包括:嗜肺军团菌血清1型、肺炎支原体、Q热立克次体、肺炎衣原体、腺病毒、呼吸道合胞病毒、甲型流感病毒、乙型流感病毒和副流感病毒1、2和3型。
已报道的非典型性肺炎的病原体有很多,其中最常见的有:
嗜肺军团菌
人最易感染的是嗜肺军团菌血清1型,非典型性肺炎常伴随有全身症状。10%的肺炎是由嗜肺军团菌血清1型引起的。在血清学诊断中, 间接免疫荧光法(IFA)是唯一的标准技术。
肺炎支原体
肺炎支原体引起的肺炎在儿童和青少年中最为常见,由于很难将其固定在载玻片上,因此先将肺炎支原体抗原固定在细胞中。
Q热立克次体
Q热是由Q热立克次体引起的全身疾病,会造成发热、非典型性肺炎、肝炎或心内膜炎。血清学诊断中,IFA检测是最灵敏和最具指示性的血清学诊断方法。
肺炎衣原体
肺炎衣原体极易造成呼吸系统感染,特别是支气管炎和肺炎。在老年人中发病率较高,它所引起的肺炎占所有肺炎病例的10%。微量免疫荧光法(MIF)是最灵敏和最特异的诊断方法。
腺病毒
腺病毒是一种重要的呼吸道病原体,能引起上呼吸道疾病,伴随有急骤发热和轻度呼吸道感染。
呼吸道合胞病毒
呼吸道合胞病毒(RSV)是两岁以下幼儿呼吸道感染的主要病原体,在冬季爆发流行。
流感病毒
它是流感的病原体,在具有潜在病理学的患者中会产生严重的并发症。由于它易于与其它呼吸道疾病混淆,所以在流行期临床诊断很困难。因此,实验室诊断就显得非常重要。
副流感病毒
副流感病毒1、2和3型在2-4岁儿童中能引起喉气管支气管炎(哮吼)。3型具有流行性,1和2型具有地域性。
【检测原理】
间接免疫荧光法(IFA)是基于待测样本中的抗体与吸附在载玻片上的抗原发生的反应。样本中存在的特异性抗体和抗原反应,未与抗原结合的免疫球蛋白在洗涤步骤中除去。在下一步骤中,抗原-抗体复合物与荧光素标记的抗人球蛋白反应。用免疫荧光显微镜观察结果。
【主要组成成份】
除PBS外,所有试剂均可直接使用。为了易于识别,所有试剂均有一个给定的编号。在操作骤中,写明了每一步所使用试剂的编号。
1 载玻片:10片(10孔/片),含有下列抗原:
1. 嗜肺军团菌血清1型(%正常鸡卵黄囊中以增强抗原吸附性和避免细菌聚集)
2. McCoy细胞中的肺炎支原体
3. Q热立克次体II期(%正常鸡卵黄囊中以增强抗原吸附性和避免细菌聚集)
4. 肺炎衣原体(原生小体)
5. HEp-2细胞中的腺病毒
6. HEp-2细胞中的呼吸道合胞病毒
7. LLC-MK2细胞中的甲型流感病毒
8. LLC-MK2细胞中的乙型流感病毒
9. LLC-MK2细胞中副流感病毒1、2和3型
10. 质控孔。
除了嗜肺军团菌,载玻片中的所有抗原都是从细胞培养物中获得。每一个病毒孔里都含有1%~15%用甲醛灭活的感染细胞,无感染的细胞用丙酮固定。
2 PBS:1瓶,pH ,用1L蒸馏水溶解。
3 阳性质控:500 µL阳性质控血清,含叠氮钠。
4 阴性质控:500 µL阴性质控血清,含叠氮钠。
5M FITC标记的抗人IgM结合物:2 x ,荧光素标记的抗人IgM磷酸缓冲液,含有伊文斯蓝、叠氮钠和蛋白稳定剂。
6 封闭介质:3mL,甘油缓冲液,含叠氮钠。
7 抗人IgG球蛋白(吸附剂):1 x (羊抗人IgG,含叠氮钠)。
需要但未提供的材料:
精确的微量移液器
恒温培养箱
蒸馏水
24x60 mm盖玻片
湿盒
荧光显微镜以及制造商推荐的滤光片
【储存要求及有效期】
2~8℃储存。不要使用超出标签上有效期的试剂。未拆封的试剂盒2~8℃储存可稳定至标示有效期的月末。
拆封后试剂的储存
试剂
稳定性和储存
溶解后的PBS
2-8ºC 4个月,在有效期内使用
其它组分
参照包装标签的有效期(2-8ºC储存)
试剂的稳定性及操作
在无菌条件下操作试剂以防微生物污染。仅使用试验所需量的吸附剂、PBS、质控血清和结合物溶液,剩余的试剂不要倒回瓶中。PBS溶解后储存在2~8 ºC,如出现浑浊请勿使用。
对于试剂盒内试剂的不正确操作,VIRCELL, 。
【适用仪器】
荧光显微镜
【注意事项】
1. 仅用于体外诊断。仅限专